2017年华东六省猪伪狂犬病感染抗体检测

猪伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的高度接触性、急性传染病。在世界大部分地区呈地方性流行。该病毒有潜伏感染特性，可以伴随宿主一生。猪的三叉神经节、骶神经节和扁桃体是病毒的主要潜伏位点。应激（如运输、保定）和荷尔蒙失调（如妊娠、产仔）均可使病毒活化并排出 。猪群感染 PRV后的临床症状各异：仔猪常表现高热、呼吸困难、运动失调并伴有神经症状；母猪出现流产，产死胎、木乃伊胎等繁殖障碍；公猪则常见睾丸肿胀、萎缩，种用性能降低或丧失等。猪感染 PRV 将终生带毒和排毒。该病毒常与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病病毒、链球菌等混合感染，因而加剧了该病的防控难度，给养猪业造成了巨大经济损失。疫苗免疫是防控 PR 的重要手段。目前国内正在通过免疫 PRV gE 基因缺失疫苗并结合 gE 抗体检测，开展 PR 控制与净化工作。但疫苗免疫并不能完全抵抗 PRV 野毒感染。新型变异毒株的出现以及弱毒疫苗的安全性隐患等，严重威胁着养猪业的健康发展。自 2011 年以来，PRV 出现了一系列新型变异毒株，其碱基序列和致病力均与传统毒株 Ea 株有较大差异，导致我国许多免疫猪场相继出现 PR 疫情 。因此，必须加强 PR的流行病学监测，掌握该病在我国养猪业中的流行状况。本研究对 2017 年华东地区 6 个省份 310个场送检的 10 179 份猪血清，进行 PRV gE 抗体检测，旨在全面了解华东地区 PR 流行特点，为日后 PR 防控提供依据。

1　材料与方法

1.1 血清样品

2017 年共收到来自华东地区 6 个省份 310 个不同规模猪场送检的 10 179 份血清样品（表 1）。各猪场抽样策略为系统抽样。各猪场均未使用含gE 基因的 PRV 疫苗。

表 1　样品来源及分布情况

1.2　检测试剂

猪伪狂犬病病毒 gE 抗体阻断法鉴别诊断试剂盒：购自美国 IDEXX 公司。

1.3　检测方法

取抗原包被板，在反应孔中加入 2 倍稀释的待检血清样本 100 μL，并加入等量的阴性和阳性对照，于 18~26 ℃放置 1 h 后，弃去孔内液体，用洗涤液洗涤 4 次后拍干；每孔加入 100 μL 酶标记抗体，18~26 ℃ 孵育 20 min 后，弃去孔内液体，用洗涤液洗涤 4 次后拍干；每孔加入 100 μL TMB底物液，18~26 ℃避光反应 15 min 后，加入终止液 50 μL，终止反应，5 min 内用酶标仪测定并记录其波长 650 nm 下的光密度值。在阴性对照值（N）减去阳性对照值（S）≥ 0.30 成立的前提下，当被检血清样品的 S/N ≤ 0.60，样品判定为 PRV gE 抗体阳性；当被检血清样品的 S/N ＞ 0.70，样品判定为 PRV gE 抗体阴性；如果 0.60 ＜ S/N ≤ 0.70，则判定为可疑，需再次检测。在进行猪场结果判定时，如果猪场有 1 个样品为阳性，则该场判定为 PRV野毒阳性场。

2　结果与分析

2.1　总体情况

在 10 179 份血清样本中，检出 PRV gE 抗体阳性血清样本 4 546 份，平均样本阳性率为 44.66%；检出阳性猪场 248 个，平均场群阳性率为 80.00%。

2.2　空间分布

华东地区 6 个省份样本中均有 PRV gE 抗体阳性被检出，其中山东样本阳性率最高（62.16%），其次是浙江（48.29%）、 福建（47.36%） 和江西（34.42%）， 而江苏（32.83%）和安徽（28.21%）较低；浙江猪场 PRV gE 抗体阳性率最高（89.09%），其次是山东（84.38%）、江苏（79.69%）和江西（73.08%），而福建（68.00）和安徽（66.67%）较低（表 2）。

表2　不同省份猪群 PRV gE 抗体检测情况

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