核酸检测实验室污染的快速排查与处理

第三步：污染处理

3.1.污染严重区域的处理，在确定污染源和污染区域后，使用二氧化氯对污染最严重的区域进行擦拭或清洗（注：二氧化氯有腐蚀性，擦拭后半个小时尽快用水清洗干净）。擦拭与清理3次后，对污染区域再次采样，检测，直到结果都为阴性为止。（最好使用有内参作为试验成功的参照，部分消毒剂或环境杂质对PCR有影响，在没有内参的情况下，即使核酸浓度很高，也没有扩增曲线，判为阴性，误以为污染已经清理干净）

3.2.不严重区域的处理，当最严重的区域污染处理完后，再使用二氧化氯处理其他不严重区域（先处理污染最严重区域的原因是以免人为扩大污染面）。

第四步、其他注意事项

4.1.移液器造成的污染，可能导致整个试剂盒的污染，移液器污染排查方法是：取 500μL水，用移液器（不带吸头），反复吹吸N次后，从500μL水中取样进行检测，出现曲线，说明存在污染，反之。

4.2.被污染的试剂盒，并非没有使用价值了，可以将其当作污染区域排查试剂，用于调查污染最严重区域。污染源的核酸浓度高于其他区域，其Ct值要远低于其他区域，使用被污染的试剂盒即可。（个人经验，供参考）

4.3.编者团队所处理的污染中，以阳性对照污染、核酸产物污染和阳性样本污染最为常见；其中阳性对照污染主要是因为加阳性对照没有固定移液器、离心阳性对照等引起；核酸产物污染主要以八联管没有盖紧或因其他因素被打开，导致外泄，反应液在反应孔被蒸发而引起；阳性样本的污染主要为没有勤换手套，离心板架没有清洗等操作不合格而引起。

实验室对工作人员相关操作进行严格规范，对每一步可能导致实验室污染的操作都严格按照标准规范进行，是可以减杜绝实验室污染的。

4.4.不建议对荧光定量设备的孔位进行强氧化剂的消毒。强氧化剂消毒剂可能腐蚀孔位，对荧光的采集造成严重影响。下图为某实验室出现污染后，实验室人员对设备孔位喷洒84消毒液，导致该设备孔位因此腐蚀，出现故障。

图3：某设备孔位残留大量白色粉末

4.5.荧光定量设备污染，不会对结果造成影响；通过采样确定荧光定量设备被污染，只是说明设备采样部位存在核酸，只要核酸没有污染到配液和加样，对结果没有任何影响，不会产生假阳性。设备被污染后，可以将设备搬离试验区域，减少气溶胶的产生，同时使用相关清洁剂或酒精对设备表面多次擦拭，并采样监测。

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