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不同布鲁氏菌血清学方法检测牛羊血清抗体的比对

时间:2021-11-06    点击: 次    来源:中国动物检疫    作者:李盛琼等 - 小 + 大

2.2 羊血清样品检测

采用SAT、cELISA、FPA对92份已知感染情况的羊血清(13份阳性、79份阴性)进行检测,比较其敏感性和特异性。结果(表2)显示:3种检测方法的Kappa 值均大于0.75。SAT和cELISA的假阴性数均为1份,假阳性率均为7.69%;cELISA和FPA的假阳性数均为1份,假阳性率均为1.27%。

3 分析与讨论

实验室诊断结果可为布病临床诊断提供依据。如果因实验室诊断结果假阳性率偏高而造成误诊,那么阴性畜的误杀会造成不必要的经济损失;如果因实验室诊断结果的假阴性率偏高而造成漏诊,那么会为病原扩散和疾病蔓延提供机会,且不利于布病净化。无论是误诊还是漏诊,都会造成养殖户恐慌与经济损失,严重危害公共卫生安全。

假阳性率能反应试验方法的特异性,假阳性率越低,特异性越高。本试验对3种血清学检测进行对比分析,发现牛羊血清的SAT假阳性率均为0,说明该方法具有较高的特异性。假阴性率能反应试验的敏感性,假阴性率越低,敏感性越高。本试验结果显示,牛羊血清样品的SAT检测结果假阴性率较高,说明其敏感性较低。SAT方法简便、特异性高,因此在临床上得到广泛应用,也是我国布病确诊的常用方法。但SAT方法结果判定需要20 h以上,况且通过肉眼观察比较浑浊度,易受人为因素干扰,因此不适于现场应用与大批量样品检测。敏感性不高是SAT 的主要缺陷,但因其具有较高的特异性,所以在几个已宣称为“无布病”国家的布病根除运动中得到了良好应用。虽然SAT不再是OIE推荐的牛布病检测方法,但其依然被广泛应用于人类布病检测。

cELISA具有较高的特异性,可以区分自然感染和免疫。本次试验结果显示,cELISA的一致性、特异性、敏感性均有较优表现。此方法操作简便,一次可完成大量样品检测,既可作为筛选试验应用于动物群体检疫,也可作为布病确诊试验,2018年被我国纳入布病法定检测方法。相对而言,在实际检测过程中,cELISA检测结果更为可靠。

FPA试验结果显示,其敏感性达到100%,特异性达到97%以上,表明FPA作为筛选试验用于布病检测有较好的应用前景。该方法敏感性较好,不容易造成漏检,其一致性和特异性也表现较好;整个过程在单个试管的溶液内进行,无需沉淀和洗涤,分析时间只需几分钟。FPA与ELISA比较,反应时间短,省去了洗板和孵育时间,但需要特定仪器进行测定,不适合基层推广。任燕斌等统计分析发现,FPA在临界值为95 mP时,其敏感性达到100%、特异性为99.6%,认为可以把FPA检测技术作为动物布病诊断方法之一,且在田间条件下,作为动物布病的筛选试验,可以快速、准确诊断布病,避免二次抓捕动物。

经上,为了降低繁重的工作量,可以先采用价格低廉、操作比较简便的SAT进行筛选,再用特异性较好的cELISA或FPA复核,进行联合诊断较为理想。

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