不同布鲁氏菌血清学方法检测牛羊血清抗体的比对

摘要：为评价不同布鲁氏菌血清学方法检测牛羊血清的性能，采用试管凝集试验（SAT）、竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）、荧光偏振试验（FPA）3种常规血清学检测方法，对已知感染情况的牛羊血清进行布鲁氏菌抗体检测，比较这3种方法的一致性、敏感性与特异性。结果显示：SAT检测牛血清的Kappa值小于0.75，一致性一般；cELISA、FPA检测牛羊血清的Kappa值均大于0.75，一致性较好。SAT特异性较高，假阳性率均为0，但敏感性较低，假阴性率较高；cELISA敏感性和特异性较为理想，均在92%以上；FPA敏感性最好，为100%，特异性也较高，达97%以上。结果表明，SAT特异性高，但敏感性略低，cELISA和FPA敏感性、一致性和特异性均较好。结果提示，在实际诊断中，先用操作简便的SAT进行筛选，再用操作较为复杂、需要特定仪器、特异性高的cELISA和FPA进行复核较为理想。

布鲁氏菌病（以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌感染引起的一种人兽共患传染病。动物布病主要见于羊、猪、牛、犬，主要临床表现为生殖器、胎膜发炎，以致流产、不育以及各种组织的局部病灶，给我国畜牧业造成严重经济损失（每年因布病减少幼畜105万~140万头）。全世界每年因人畜布病造成数十亿美元的损失。

由于牲畜的自由买卖，跨区域调运，近年来布病疫情出现了一定的回升，因此需要加强布病监测和流行病学调查，监视疫情变化，做好预防与诊断。布病的实验室诊断是布病研究的重点和难题。血清学诊断方法虽然存在一定的假阳性、假阴性现象，但因其操作简单、试剂易保存、生物风险小、适用性广，得以广泛应用。本研究采用试管凝集试验（SAT）、竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）、荧光偏振试验（FPA）3种常规血清学检测方法，对已知感染情况的92份牛血清、92份羊血清进行布鲁氏菌抗体检测，并对检测结果进行分析，比较这3种血清学检测方法的检测性能，以期为布病血清学方法的选用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

血清样本　血清样本为本中心保存的已知感染情况的牛、羊血清，各92份。

1.2 方法

试验方法　SAT按照GB/T18646—2018进行操作与判定，cELISA、FPA按试剂操作说明书进行操作和结果判定。

数据处理　对检测数据采用 Excel 处理，用 SPSS 23.0 软件进行统计学分析。采用假阳性率、假阴性率、一致率和Kappa值4种分析指标。假阳性率，即在确诊的阴性样本中，用该方法检测阳性数与确诊阴性数的百分比；假阴性率，即在确诊的阳性样本中，用该方法检测阴性数与确诊阳性数的百分比；一致率，试验判定结果与标准诊断结果相同数占总检测数的比例；Kappa值，是一致性统计指标，Kappa值≥0.75说明两种方法诊断结果一致性较好，0.4≤Kappa值＜0.75说明一致性一般，Kappa值＜0.4说明一致性不够理想。

2 结果

2.1 牛血清样品检测

采用SAT、cELISA、FPA对92份已知感染情况的牛血清（47份阳性、45份阴性）进行检测，比较其敏感性和特异性。结果（表1）显示：通过Kappa检验，cELISA、FPA的Kappa值均大于0.75，SAT的Kappa 值小于0.75；SAT的假阴性数为12份，假阴性率为25.53%，cELISA和FPA假阳性数均为1份，假阳性率均为2.22%。

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