核酸检测实验室污染的快速排查与处理

因技术服务原因，编者团队经常会接到很多实验室污染问题的处理，从而了解到很多人在面对实验室污染时，一筹莫展，茫然又无助，故此总结了以下内容分享给大家，如何快速进行实验室污染的快速排查与处理，如有不周到之处，还望指出。

第一步：如何判断实验室出现污染

最简单的判断方法就是，当你设置的阴性对照都有了曲线，说明实验室出现了污染。如下图1，阴性对照的Ct值为31，且有明显S型曲线。

图1：某次污染的试验结果

特别说明：实验室在加样时，使用试剂盒自带的阴性对照，仅能监控试剂是否存在污染，如果同时设置无模板对照（纯化水）和试剂盒阴性对照，可对试验的全过程和试剂分别监控。

第二步：污染区域排查

2.1.首先在试剂准备间配置几个阴性对照，上机扩增；如果此时的阴性对照没有曲线，说明试剂没有被污染，可以继续使用；如果出现了曲线，说明试剂准备间已经被污染，请另外准备一套耗材、试剂盒，在一个新房间或者区域，重新配置阴性对照，直到阴性对照没有曲线，证明配液不存在问题。

2.2.全面采样，使用湿棉签，对实验室不同房间的各个区域进行采样，样本处理间：离心机盖、移液器、工作台面、地面、门把手等等；PCR扩增间，PCR仪器表面、电脑键盘、鼠标、桌面地面等等。

2.3.棉签加入500ul纯水后，离心取上清，加入体系，上机。

2.4.结果分析，不同区域的结果不同，所采集区域Ct值越低，说明污染越严重，是污染源头。

图2：污染区域采集样本检测结果

说明：其中Ct值最小的样本来源于离心机，其他有曲线的样本分别来源于试验台面、PCR仪器、电脑键盘、鼠标、实验室门把手等。

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