2015—2017年我国猪繁殖与呼吸综合征流行毒株遗传变异分析

对于3个N- 糖基化位点（N33、N44 和N51），N33 有变化，N44 与 N51 没有变化。标准毒株中，第一亚群为 N33，第二亚群为 N34，第三亚群 N34，第四亚群中的代表毒株均为N34N35，第五亚群的代表毒株均为 N34S35。2015—2017 年分离的毒株中，有 6 株为第一亚群，其中 SDLY-1706/SDYT-1706 第 33 位点为 S33，其他 4 株 为N33。35 株第四亚群中，LNSY-1708/JL-16/YNKM-1707/SDDY-1612 为 S35，其他 31 株为 N35；第 34位点变化较大的有 N34、G34、S34。11 株第五亚群中，第 34、35 位氨基酸位点均为 N34S35。6 株第六亚群中第33、34、35位氨基酸位点均为G33N34S35（图3）。

图 3 2015—2017 年分离 PRRSV 株氨基酸分析

3　讨论

自 2006 年江西省暴发高致病性 PRRS 疫情后，PRRSV 由于感染压力及自然选择，其基因序列不断发生变异和重组，从而使该病防控成为难题。目前有效的疫苗免疫仍是防治 PRRS 的最有效手段。PRRSV GP5 基因编码的蛋白是 PRRSV 主要的免疫原性蛋白，是刺激机体产生中和抗体的重要蛋白。在 2015—2017 年分离的 58 株 PRRSV 毒株中，有 6 株属于以 VR2332 为代表的第一亚群，35 株属于以 JXA1/TJM-F92 为代表的第四亚群，11 株属于 NADC30 为代表的第五亚群，6 株属于新亚群。由此可以发现，我国 PRRSV 毒株存在易变异和多样性等特点，并且所分离毒株并没有严格的地域差异，这为 PRRS 的防疫带来了更大挑战。

囊膜糖蛋白 GP5 在 PRRSV 感染的细胞内虽然表达水平较低，但它却是主要的免疫原性蛋白。在不同毒株间，GP5 蛋白是各结构蛋白中变异最大的，其氨基酸位点变化可以改变中和抗体效果。在 2015—2017 年所分离的 58 株野毒株中，6株第一亚群野毒株中和抗体位点为 L39，35 株第四亚群野毒株中和抗体位点为 I39，11 株第五亚群中和抗体位点为 L39，6 株新亚群中和抗体的位点为 S39。由此可推断中和表位在不断变化并逐步变异。GP5 蛋白一些主要位点的变异并无地域性差异，随着时间的推移和基因亚型的改变，中和保护位点也在不断发生变化。从 2015—2017 年的分离株基因分析来看，GP5 蛋白第 151 位毒力位点发生的变化较大，由第一亚群 R151 向第六亚群 K151 转变，这与李广兴等的研究一致。野毒株 R151 变异主要影响PRRSV 中和抗体抑制病毒的效果，但关于病毒毒力的影响尚未见报道。由此推测，不同地方分离毒株间存在一定的毒力差异；GP5 蛋白第 151 位毒力位点的不同导致不同亚群 GP5 抗体抑制 PRRSV 的能力存在差异。关于 3 个 N- 糖基化位点（N33、N44 和 N51）的变化，N33 变化较大，而 N44 与 N51 则没有变化。由此推断，N- 糖链糖基化位点也在变异，但是这个突变是否影响病毒毒力，有待进一步证实。

4　结论

通过以上结果可以得出以下结论：我国PRRSV 毒株呈多亚群共存，不同亚群毒株毒力及中和保护位点存在差异，同一亚群毒株毒力及保护位点也有差异。这些基因序列的变化为该病防疫带来了较大压力。因此，针对 PRRS 防控，必须进行田间毒株的检测和基因分析，然后选择相应基因型毒株疫苗进行免疫，切勿盲目选择疫苗，以免造成经济损失。

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