猪病检测标准采样流程及注意事项

3、采样时间：

3.1 免疫抗体：疫苗免疫后3－4周以上；

3.2 母源抗体：CSFV抗体20-50日龄，伪狂抗体35-70日龄；

3.3 野毒抗体：发病康复后2周以上。

4、采样数量：样品采集量取决于本次检测的目的、内容、被检猪群健康状况等。

5、血清样本量的计算公式：n=[1-(1-a)1/D]×[N-(D-1)/2]

n-样本量大小  a-置信区间   D-估测阳性动物数   N-动物总数。

6、血清样本的数量：多数情况下，根据以往的实践和统计学经验，20－30以上的样本被认为是合理的（介于29和19份之间），在检测10-15%的流行的疾病时获得95%的可信度。

7、猪血液样品采集：

7.1 前腔静脉采血：适用于各阶段的猪，采血量不限，可能损害迷走神经。（右侧迷走神经较少）

7.2 耳静脉采血：成年猪（经产母猪），采血量1-2ml，使用注射器或刀片；易形成血肿，血样易污染。

8、血清样本的制备：

8.1 血清：血液流出血管后不经抗凝处理，会很快凝成血块，随着血块逐渐缩紧会析出淡黄色的清亮液体，称为血清。

8.2 析出血清：采血完毕后，（一般3ml血液足够用于抗体检测）将注射器拉至最大刻度，室温下平放静止析出血清。或置于37℃温箱中1h后置2-8℃中1h，析出血清。

不符合要求的血清：溶血、胶冻样、浑浊等。

三、样品的保存、包装、运输

1、样品的包装

2、运输注意事项：所采集的血液样品如需在采血器内直接送样，并套上针头帽，防止内容物泄露，之后10个左右注射器为一捆，用胶带缠绕捆绑，平放在保温箱内塞实，以最快途径送往实验室。

如果样品能在采集后24h内送抵实验室，则可放在加冰袋的（4℃左右）保温容器中运送。

在24h内不能将样品送往实验室，组织或已离心出血清的情况下，需将样品冷冻，装在保温箱内加冰袋维持低温状态运送。

如需寄送，装箱时要垫上足够缓冲材料。

甲醛固定的组织样品，需在常温条件下充分固定，不能冷冻，以防止组织形态改变。

3、样品的运输：

3.1 要求：低温，快速、信息明确、提前沟通。

3.2 注意事项：

3.2.2 建议顺丰快递/大巴车；

3.2.3 确保过程低温，保证样品的可用性；

3.2.4 不宜运输死亡动物尸体。

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