猪病检测标准采样流程及注意事项

8、拭子样品的采集

8.1 猪鼻拭子样品采集：用于病原分离及分子生物学检测

保定猪只，右手持棉签，先将猪鼻孔周围擦干净，再使用新棉签与猪鼻中隔呈45°角轻轻插入，与鼻中隔平行方向插入约2cm，轻轻转动棉签1周，停2-3s，再轻轻转动棉签1周，拔出棉签，置于加有1ml生理盐水或PBS的无菌离心管中，冷藏保存运送。

9、积液、皮肤样品的采集

9.1 积液的采集：包括胸腔积液、心包积液、脑积液、关节液等；

9.2 采集方法：使用一次性注射器无菌抽取1-2ml；直接涂抹于载玻片上干燥后常温运送置于离心管中，冷藏/冷冻保存运输。水泡液、脓包：方法同积液采集；痂皮：无菌剪取此部位皮肤组织置于样品袋中；常温运送。

10、血涂片的制作

注射器采血后，滴出5-7ul的新鲜未凝固的血液或抗凝血(易引起红细胞皱缩和白细胞聚集)于干净载玻片的一端，左手拿住该载玻片的两端、右手拿住另一载玻片的一端，在左手的载玻片上由前向后接触血滴，使两载玻片约成45°角(决定厚薄，检测目的)，轻轻移动使血滴成一条直线，由前向后推成均匀的薄片，空气中自然干燥。

11、组织样品的采集——病理组织学检测样品采集

11.1 样品选择：处于急性发病期、新鲜组织样品；

11.2 取样部位：正常组织与病变组织交界处；

11.3 采样要求：避免造成人为的损伤(来回锯拉组织、镊子捏压取样部位）；

11.4 取样大小：1*1*0.5cm(脑为径向切开、一半进行固定);

11.5 处理要求：广口固定容器，10%福尔马林溶液（4%的甲醛溶液）固定，组织与固定液比例1：10~20为宜，常温固定，固定前后均不可冷冻；如用作冰冻切片，则需将组织块放在0~4℃容器中，尽快送达实验室。

12、抗凝血样品的采集

在采血器内加入适量的抗凝剂（1%肝素、EDTA-K2、3.8%柠檬酸钠），采血后，反复颠倒采血器，使抗凝剂与血液充分混匀。

二、抗体检测采样的原则及要点

1、采样前要考虑的几个方面：

1.1 采样目的：免疫评估、风险预警、疫病辅助诊断；计划所采样品能否解决采样目的。

1.2 采样方法：科学、规范；

1.3 采样时机：及时、准时、规律性；

1.4 检测方法：检测方法对样品的要求，样品种类、量、状态等；

1.5 生物安全：人员防护、防止问题扩大、重要疫病排除；

1.6 样品信息：询问编号、免疫、用药、临床情；

1.7 其他方面：包装、运输、样品保存条件等。

2、样品背景信息收集：

2.1 免疫程序：免疫日龄、疫苗种类、厂家、免疫方式；

2.2 临床用药：药物种类，厂家、使用量、用药途径；

2.3 发病情况：发病特点、日龄、典型临床症状、发病率、死亡率；

2.4 病理变化：各组织脏器的大体解剖病理变化；

2.5 现场观察：动物外观、大群、饮食、呼吸、环境、气味；

2.6 记录：笔记、档案、照片。

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