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非洲猪瘟病毒在野猪尸体内的存活研究

时间:2021-10-02    点击: 次    来源:中国动卫中心    作者:佚名 - 小 + 大

3 结果
3.1 挖掘出的野猪尸体样品数量及腐烂情况

从20个挖掘点挖出的尸体中,共获得45个骨髓样品和18个组织样品(见表S1)。尸体样品在挖掘前18至440天被埋在地下并处在不同的腐烂阶段。分解状态因挖掘点和掩埋时间的不同而不同。在两个挖掘点采集到评分为①的尸体,挖掘到评分②的尸体11具,在8具尸体中仅发现骨头(评分③)并进行取样(见图2)。只有在9#挖掘点,可清晰地识别两具具有不同分解评分的尸体,并获得了单独的样品板。在其他挖掘点,要么只掩埋一具尸体,要么无法辨认相应尸体碎片,则采用一般尸体评分法。其中7个挖掘点的尸体在掩埋时的腐烂情况亦有进一步资料(见图2)。

图2样品尸体掩埋时间和状况概览。在每个挖掘点挖掘出的尸体状况评分(右侧)已评估。如果有多具尸体且同一挖掘点的尸体腐烂程度不同,则分别进行评分。如有资料,则添加掩埋时的尸体状况评分(左侧)
3.2 除3个尸体挖掘点和7个土壤样品挖掘点外,其余所有挖掘点都进行了基因组检测
本研究选择的所有挖掘点都发现了常规检测期间通过qPCR初步检测到的非洲猪瘟病毒基因组呈阳性的野猪尸体。挖掘后复检时,除3具尸体标本外,其余尸体标本均可通过qPCR再次检测到非洲猪瘟病毒基因组。初始检测的ct均值为29.8,SD为3.94。挖掘的尸体样品ct均值为31.14,SD为3.32(见图3)。在7个挖掘点(见图2),土壤样品的qPCR检测结果为非洲猪瘟病毒阳性,ct均值为34.12 (SD: 1.29)。除6个挖掘点外,其余挖掘点均发现猪细胞色素B基因残留,ct值平均值为31.18 (SD: 3.84)。仅在一个挖掘点(#5)检测到非洲猪瘟病毒基因组,未检测到猪DNA。所有土壤样品的内部对照(β -肌动蛋白基因)检测呈阳性。
3.3 病毒分离
从挖出尸体的骨髓和组织标本中均未分离到传染性非洲猪瘟病毒。在巨噬细胞上传三代的样品和没有传代的样品中,均未观察到任何血细胞吸附。此外,直接免疫荧光试验无任何迹象表明存在传染性非洲猪瘟病毒。

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