非瘟4种检测试剂盒的比较及7种消毒剂对检测结果的影响

ASFV 感染的靶细胞主要是猪单核－巨噬细胞，因此，猪感染ASFV 后，大多数病变是由于受感染和活化的单核细胞和巨噬细胞，触发了细胞因子介导的相互作用，而不是病毒引起的直接细胞损伤。ASFV的进入和脱模工作模式如下图所示：

图1：ASFV进入和脱模工作模式

A-非洲猪瘟病毒可以通过网格蛋白介导的内吞作用和肌动蛋白驱动的巨胞吞作用进入猪巨噬细胞（一 旦被内吞，进入的颗粒便从早期的内体和大微粒体转移到晚期的多囊泡内体，在此经过低ｐＨ 值驱动的逐步拆分组装过程，它涉及衣壳的破坏、外膜的解离以及内部病毒包膜与限制性内体膜的融合，结果裸露的核心被传递到细胞质中，并在此进一步脱衣壳以释放具有复制能力的基因组。膜融合和核心传递取决于内部包膜蛋白pE248R）；

B-胞外ASFV 颗粒的网格蛋白介导的内吞作用；

C-巨胞饮作用；

D-早期内体中的完整病毒体；

E-晚期内体中被破坏的颗粒（无衣壳，且具有破碎、部分分离的外被膜）；

F-胞质裸核。

一、非洲猪瘟病毒荧光定量 PCR 的建立及4种检测试剂盒的比较

目前，对多种非洲猪瘟病毒 荧光定量 PCR 检测试剂盒的敏感性、特异性及稳定性等尚缺乏较为系统的比较。该研究所对临床常用的 4 种商品化非洲猪瘟病毒核酸 qPCＲ 检测试剂盒进行评估，结果表明当样品中的非洲猪瘟病毒核酸含量较低时，各试剂盒的检测结果存在一定的差异。

目前的非洲猪瘟病毒荧光定量 PCR方法虽然敏感度较高、特异性强，但用于检测拷贝量低的核酸样品时( 如未出现临床症状的猪，或病毒感染早期的猪) ，还存在一定的局限。由于非洲猪瘟病毒在自然感染后的潜伏期为 4 ～ 9 d， 这也是早期诊断、早期精准清除的关键时期，但由于在潜伏期内，感染猪的排毒量通常比较低，在 临床筛查时，一是尽量选择敏感度高的试剂盒，二是当样品 CT 值在 35 或 35 以上时，以及在没有 CT 值时，需要慎重判定结果，必要时可用不同的试剂盒重复检测，或对猪群连续采样监测。

二、七类消毒剂对非洲猪瘟病毒荧光定量 PCR 检测结果的影响

有研究机构为评价七类消毒剂对非洲猪瘟病毒荧光定量 PCR 检测结果的影响，做了有关实验，按消毒剂说明书推荐选择不同工作浓度，分别与不同滴度的非洲猪瘟病毒培养物于 20 ℃条件下作用 30 min 后，采用荧光定量 PCR 方法检测作用后产物。

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