浅谈PCR实验室环境污染的监控措施及规范化操作流程

1)IDEXX RealPCR™ ASFV DNA Mix

2)IDEXX RealPCR™ PC DNA Tracker

（阳性对照追踪DNA检测混合液）

3)IDEXX RealPCR™ Signal Check

（QC细菌DNA检测混合液）

实验室环境监控方案

* 根据具体实验室检测内容来确定

（ASFV、PRRSV、PEDV、CSFV ……）

实验室环境监控结果解读

* 根据具体实验室检测内容来确定（ASFV、PRRSV、PEDV、CSFV ……）

2.6 PCR实验室环境污染处理措施

【方法一】将84消毒液配置成最终有效氯浓度为2000 mg/L的溶液，对重点污染区进行擦拭；孵育5分钟后，用洁净的纸巾擦拭干净，再用清水或75%酒精进行两遍清洗。

【方法二】使用商品化核酸清除试剂（如DNAZap、DNAOff或DNAAway）进行处理。使用时直接将商品化试剂喷涂于需要处理的区域，孵育5分钟后用洁净纸巾擦拭干净后，再用清水或75%酒精进行两遍清洗。同时建议配合房间的紫外灯和移动紫外灯（照射高度30-50 cm）对重点污染区、离心机、PCR仪等进行照射。建议消毒完后再进行各房间的通风。

2.7 PCR实验室高风险污染区域的处理方法

移液枪：单按钮移液枪：缓慢匀速移液。各区的移液枪要单独使用且应有各自的标识；使用后，移液枪锥嘴处及表面用75%酒精溶液清洁。若使用过程中发生污染，应及时对移液枪咀使用75%酒精浸泡15分钟左右。可考虑使用Eppendorf R-II移液枪（防止气溶胶污染）。

离心机：每次实验开始前，用75%的酒精擦拭离心机（外表、转子及内壁）。每次实验完毕后，先用84消毒液浸泡过的软布擦洗离心机，再用洁净的湿布擦洗，待干后盖上机盖。每月使用中性去污剂清洁转子与离心室（打开离心机盖，拨掉电源线，用专用设备将离心机转子旋下）。

qPCR仪器：定期清洁热盖和反应槽。具体方法：关机后，将反应槽取出，打开热盖，用95%酒精或异丙醇浸透的棉棒擦拭反应孔（逐孔擦拭，污染严重时需逐孔更换擦拭所用的棉棒）和热盖，待酒精或异丙醇挥发后再将反应槽安装好，将热盖恢复原位。若发生污染严重时则改用中性消毒液，按上述步骤消毒，然后再用95%酒精或异丙醇擦拭。

注意：实验室环境监控出现污染并处理后，仍需要对处理后的效果进行二次评估，确定没有污染后才可以进行实验。

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