浅谈PCR实验室环境污染的监控措施及规范化操作流程

下面是对PCR实验室划分的监测重点区域和关键的仪器耗材：

实验区域：按区域采样：试剂准备区、核酸提取区、 PCR 扩增区。采样重点是在操作台面和控制按钮、冰箱门把手、离心机、枪头盒盖等。

仪器耗材：移液枪、离心机、涡旋振荡器、核酸提取仪、PCR仪等。

2.2 PCR实验室的环境采样

实验室环境采样需要使用专用拭子（一般长度在10-15cm，易折断为佳）。使用时将它浸入装有350-500微升PCR级水的1.5ml离心管中，然后将拭子在离心管壁上适度挤压，去除多余的水。注意：在不同区域采样时需更换拭子。

1)将拭子在长约30cm的取样区域旋转擦拭2-3次（台面或离心机内表面）。然后将拭子放回离心管，涡旋震荡10-15秒，洗脱拭子上捕获的核酸。

2)按上述方法去除拭子上的水，剩下液体作为检测样品。具体采样检测操作如下图所示：

2.3 PCR实验室气溶胶污染的监控

气溶胶污染的监控主要针对超净工作台和生物安全柜：可以采用空气采样方式。

1) 将6-8层纱布，其面积为30cm*30cm，用PCR级水或无核酸残留的纯净水浸润，打开风机，将其放在出风口5-10分钟后取出。将纱布放在带盖的塑料离心管内，涡旋振荡10-15秒，洗脱纱布上捕获的核酸。

2) 或者，将装有30-50微升PCR级水的1.5ml离心管，敞开盖放置在不同的监测区域12-24小时采样，然后进行检测。

2.4 PCR实验室环境监控频率

我们可以根据实验室不同的等级划分和检测样本的情况，建议采取如下三种频率进行：

1)一般实验室监控频率可以按照: 每周或每两周监测1次进行。【基层实验室】

2)检测样本非常频繁，需要增加监控频率：每周监控1-2次。【集团中心实验室】

3)国家参考实验室：要求每天必须进行实验室环境监控。【专业参考实验室】

2.5 PCR实验室环境监控配套试剂

PCR实验室环境污染的监控需要配备专门的配套检测试剂。IDEXX可以提供各PCR实验室环境监测所需要的相关产品，帮助大家更专业地评估和及时发现实验室可能存在的污染问题。

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