唾液检测法在猪疫病监测中的应用

当前国内部分规模化猪场, 尤其中小型养猪场受到高热病的侵袭, 遭到不同程度的经济损失。而这些发生疫情的猪场大多数盲目饲养、生物安全措施基本为空白。虽然疫病防控措施及一些规章制度虽然制定的很完善, 但并没有完全落实到位, 发生疫情后造成人力、物力、财力等损耗。因此, 要重视疫病监测工作的开展, 这样才能对猪场稳定生产发挥保护作用。

养殖场应严格且认真的进行疫病免疫检测, 及时掌握本场猪群的整体免疫状态是降低猪瘟、蓝耳病、猪伪狂犬病等流行病的重要防控手段。目前大多数养猪场没有充分利用实验室检测手段, 因此在生产中使用疫苗方面存在问题, 免疫效果不理想, 甚至接种疫苗后猪群的健康状况更不稳定。因此, 养殖场应定期对不同阶段的猪进行采取血样。采集的血样尽量广泛而具有代表性, 送到有实验室检测能力的相关部门作出检测报告进行分析决策。通过动态采样监测了解猪群中存在疾病的种类, 掌握疾病感染的程度以及感染了哪个阶段的猪群, 这样才能因地制宜、适时而正确的选择疫苗接种的种类和接种疫苗的时机。同时也能够掌握疫苗的免疫效果, 也就是经过疫苗接种后可了解某些疾病的抗体水平的高低、群体猪的抗体效价的均匀度、疫苗的保护率和保护时间。

但血清学由于检测对血液采集技术要求高, 对猪应激大, 只在发病时才对猪群进行检测。本文简单介绍唾液检测法的使用方法, 供大家参考。

1 优点

采集的唾液可以直接冷冻, 唾液中的各种酶类 (如唾液淀粉酶、碱性蛋白酶) 和抗菌物质可以使样品保存更长时间。所以唾液学方法对机体无任何损伤, 不会造成猪只应激。另外, 唾液中的抗体以分泌型抗体为主, 对于免疫功能的解释具有特殊的意义。

2 唾液采集方法

唾液采集的方法简单, 利用猪只的嗜好咀嚼的特性, 采用纱布球采集唾液。将纱布制作成纱布球固定于金属线前端, 猪主动咀嚼纱布球, 唾液通过虹吸现象进入纱布球内。将纱布球内的唾液挤压出, 释放至样品袋袋内。然后, 将样品袋内的唾液转移至离心管内。

3 检测方法

采集的血液必须进行预处理, 方可进行抗体或病原等项目的检测。100 000转/分钟, 离心1分钟, 去除杂质, 留取上清。按照常规程序进行ELISA或PCR检测。

4 结果判定

唾液中病原检测若呈阳性, 说明机体正在排毒。

由于唾液中的抗体和血液中的抗体不是同个概念, 不能用对血清抗体的理解来解释唾液中抗体的作用。血清中的抗体大部分为循环抗体, 某些循环抗体的抗病活性较低, 只能与抗原起机械结合作用。而分泌型抗体的产生速度是血清循环抗体产生速度的2倍, 除具有机械结合作用外, 尚具有对抗原的主动捕捉作用, 补体的经典和补充途径激活作用, 抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用以及凝集作用。

为了便于理解唾液中的抗体作用, 可以采用相对抗体 (相对量抗体) 的概念。

5 讨论

相对抗体指按照同一方法检测出抗体量的相对大小, 往往指同一实验室, 同类试剂盒, 同类样品所得出结果的相对大小 (百分比表示) 。相对抗体的修正参数必须建立在大量检测数据的基础之上, 这些数据必须包括完全阴性值, 低抗体滴度值, 中抗体滴度值和高抗体滴度值, 样本以大样本量为宜, 标准差至少在30以上。

相对抗体的概念解决了不同实验室之间, 不同试剂盒之间和不同类型样品之间 (如血液与唾液) 的测定值的可比性问题, 相对抗体值的大小亦不受试剂盒阴阳性对照值大小的影响。而绝对量抗体则不具备此类特性。

如唾液中出现分泌型抗体, 说明机体近期被病原感染或近期接受弱毒疫苗的免疫接种;分泌型抗体的出现, 也同时说明机体具备对某病原的实质性抵抗能力。

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