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猪群监测新方法:唾液检测法

时间:2010-10-21    点击: 次    来源:南方农村报    作者:樊福好 - 小 + 大

      编者按:樊福好博士继提出“免疫指数”、“健康指数”和流行病学之“暴发指数与传播指数“后,又提出了唾液检测中的抗体检测与血清学方法的匹配性、吻合度能通过一个参数给予指示。
  对猪群用唾液检测法来进行监测,这在国内正式报告尚属首次,但在美国已经在2年前用于检测PRRS病毒,而在人医上,唾液已经应用到检测艾滋病。人们习惯的血清学检测由于对血液采集技术要求高,对猪应激大,一些猪场往往只在发病时才对猪群进行检测,但如果唾液检测法能适用,十分值得推广。本文简单介绍唾液检测法的使用方法,供参考。
  血清学检测在猪群免疫监测和疾病诊断中发挥着重大作用,但由于血液采集对技术要求较高,必须具备专用的血清分离设备(如离心机等),且操作程序复杂,况且一旦发生溶血或污染,对检测结果影响较大。人们一直期望有新的检测方法,唾液学方法是其中较有发展前景的方法之一。
  唾液学方法有很多优点:采集的唾液可以直接冷冻,唾液中的各种酶类(如唾液淀粉酶、碱性蛋白酶)和抗菌物质可以使样品保存更长时间;采集唾液的方法简单,所以唾液学方法对机体无任何损伤,不会造成猪只应激。另外,唾液中的抗体以分泌型抗体为主,对于免疫功能的解释具有特殊的意义。
  唾液采集方法:

  唾液采集的方法非常简单,利用猪只的好奇心理以及嗜好咀嚼的特性,采用纱布球采集唾液。将纱布制作成纱布球固定于金属线前端,猪只会主动咀嚼纱布球,唾液将通过虹吸现象进入纱布球内。将纱布球内的唾液挤压出,释放至样品袋袋内。将样品袋内的唾液转移至离心管内。


  检测方法:

  采集的血液必须进行预处理,方可进行抗体或病原等项目的检测。10x104转/分钟,离心1分钟,去除杂质,留取上清。按照常规程序进行ELISA或PCR检测。
  结果判定:
  1、唾液中的病原检测若呈阳性,说明机体正在排毒。
  2、由于唾液中的抗体和血液中的抗体不是同一个概念,必须避免使用对血清抗体的理解来解释唾液中抗体的作用。血清中的抗体大部分为循环抗体,某些循环抗体的抗病活性较低,只能与抗原起机械结合作用。而分泌型抗体的产生速度是血清循环抗体产生速度的两倍,分泌型抗体除具有机械结合作用外,尚具有对抗原的主动捕捉作用,补体的经典和补充途径激活作用,ADCC作用以及凝集作用。
  为了便于理解唾液中的抗体作用,可以采用相对抗体(相对量抗体)的概念。

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