随着畜禽养殖业规模化、集约化和商品化程度的增高，畜禽流动和引种工作的频繁，一些疾病的发生、发展变得越来越复杂。一些疫病屡控不止，时有起伏；部分传统疫病非典型化且临床症状日渐复杂；新的病毒感染性疫病日渐增多；一些传染病的免疫失败经常发生，引起兽医工作者极大的关注。猪瘟是严重危害养猪业最古老的疾病之一，近年来，非典型化猪瘟逐渐增多。猪伪狂犬病(PR)自1902年首先在匈牙利发现以来，世界上已有50多个国家存在，我国有20多个省、市流行本病，近来呈不断蔓延之势。猪蓝耳病又称猪繁殖和呼吸综合征(PRRS)，可感染各种年龄阶段猪。自1987年在美国首次发现以来，随后加拿大、德国、荷兰、英国、法国、日本等陆续报道本病流行。我国除台湾外，1996年才报道，但短短几年时间，很多省份都报道本病不同程度存在。近来，很多大型猪场均发生以母猪流产、产死胎、弱仔、木乃伊胎等病例，大多由该病原引起。为了摸清规模猪场中猪瘟抗体水平和免疫状况，猪伪狂犬病、猪蓝耳病阳性率和分布情况，有重点地开展相应的免疫预防，我们检测了杭州市24个规模猪场911份血清中的猪瘟、猪伪狂犬及猪蓝耳病抗体，现报道如下。
1 材料和方法
随机取样，采自杭州地区24个规模养猪场(未经猪伪狂犬病及猪蓝耳病疫苗免疫)，其中母猪血清621份，肥育猪207份，种猪(此处专指种公猪，以下同)83份，血清分离后置冰箱2l℃保存备用。
猪瘟正向间接血凝抗原、阴性和阳性血清，购自中国农科院兰州兽医研究所，试剂批号为：2001019。
猪伪狂犬病、猪蓝耳病ELISA诊断试剂盒购自美国IDEXX公司，试剂批号为06685-330FT和09265-089HT。
96孔血凝板，购自浙江华东医药公司。
猪瘟血清抗体水平的检测，采用正向血凝试验。具体操作步骤如下：即在％孔血凝板上，每孔加入50ul稀释液，每排第1孔加入待检血清50ul，递比稀释待检血清至血清浓度为1：512，最后50ul丢弃。再在每孔加入抗原诊断液25ul，置湿盒中于25℃孵育1.5-3h，判定结果。
判定标准：凡能使50％的红细胞凝集的血清最大稀释倍数为该份血清的抗体效价，猪瘟血清抗体效价高于或等于1：16视为免疫合格。
猪伪狂犬病、猪蓝耳病抗体检测参照美国IDEXX公司ELISA诊断试剂盒说明书进行。待检血清分别作1：20(猪伪狂犬病抗体检测)和1：40(猪蓝耳病抗体检测)稀释。取稀释好的待检血清100ul加入包被好的96孔聚苯乙烯诊断试剂盒中，置湿盒内25℃作用30min，取出，用洗涤液充分洗涤3-5次，甩尽残留液体，每孔加入酶标抗体100ul，湿盒内2.5℃作用30min，洗涤。再在每孔中加入TMB底物溶液100ul，湿盒内25℃；作用15min后，加入终止液100ul，立即置BIO-RAD550型酶标仪上650nm处测定。分别按所附计算公式判定是否为血清抗体阳性。
2 结果
2.1猪瘟的免疫状况
母猪、肥育猪、种猪猪瘟血清抗体效价如表1所示。在所测试的608份母猪血清中，有3份(0.49％)血清样品检测不到猪瘟抗体，45份样品猪瘟血清抗体低于1：8，占检测总数的7.4％；有563份样品猪瘟血清抗体大于或等于1：16，占92.6％；在所测试的157份肥育猪血清中，大于或等于1：16的血清份数为98，免疫合格串为62.4％；78份种猪血清中，有61份血清抗体水平高于或等于1：16，占总数的韶.2％。猪瘟免疫合格率排列顺序为母猪>种猪>肥育猪。
猪血清中猪瘟抗体效价分布和免疫效果。在所有的843份猪血清中，有5份猪瘟血清抗体效价为0，占总数的0.6％，有722份猪瘟血清抗体水平高于、等于1：16，免疫合格率为85.64％。所调查的24个大型猪场，猪瘟免疫效果相差较大，免疫合格率为57.14％—100％不等。但绝大多数场免疫水平较高，有14个猪场猪瘟免疫合格率大于或等于90％。以猪场猪免疫合格率大于80％以上计为猪场免疫合格，则有凹个猪场猪瘟免疫合格，占83.33％。可见，规模猪场猪瘟的免疫效果还是比较好的，具体结果见表1、2。
表1 母猪、肥育猪和种猪猪瘟血清抗体效价及其分布
抗体 血清份数 所占百分比／％
效价 -------------------------- ---------------------------
母猪 肥育猪 种猪 合计 母猪 肥育猪 种猪 平均
1:0 3 2 5 0.5 1.3 0 0.6
1:2 3 2 1 6 0.5 1.3 1.3 0.7
1:4 5 19 8 32 0.8 12.1 10.3 3.8
1:8 34 36 8 78 5.6 22.9 10.3 9.3
1:16 58 38 15 111 9.5 24.2 19.2 13
1:32 86 24 8 118 14.1 15.3 10.3 14
≥1:64 419 36 38 493 68.9 22.9 48.7 58.5
合计 608 157 78
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