鸡传染性支气管炎的研究进展

四、病理变化

传染性支气管炎的病理学变化主要发生在呼吸、泌尿和生殖系统的上皮组织。此外，也有一些关于肌肉、肠道，甚至腺胃出现病变的报道。

幼雏主要的病变表现为鼻腔、喉头、气管、支气管内有浆液性、卡他性或干酪样（后期）分泌物。上呼吸道因此会被水样或黏稠的黄白色分泌物附着或堵塞。鼻窦、喉头、气管黏膜充血、水肿、增厚。气囊轻度混浊、增厚。支气管周围肺组织发生小灶性肺炎。如伴有混合感染，还可见到呼吸道发生脓性、纤维素性炎症。产蛋鸡则多表现为卵泡充血、出血、变形、破裂，甚至发生卵黄性腹膜炎。若在雏鸡阶段感染过IB，则成年后鸡的输卵管发育不全，长度不及正常的一半，管腔狭小、闭塞。

主要病变表现为肾脏苍白、肿大、小叶突出。肾小管和输尿管扩张，沉积大量尿酸盐，使整个肾脏外观呈斑驳的白色网线状，俗称“花斑肾”。在严重病例中，白色尿酸盐不但弥散分布于肾表面，而且会沉积在其他组织器官表面，即出现所谓的内脏型“痛风”。发生尿石症的鸡除输尿管扩张，内有砂粒状结石外，还往往出现一侧肾高度肿大，同时另一侧肾萎缩。病理组织学病变方面表现为肾小管上皮细胞肿胀变性，甚至坏死脱落。管腔扩张，内含尿酸盐结晶。肾间质水肿，并有淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞浸润，有时还可见纤维组织增生。

五、鉴定方法

1.病毒分离鉴定：常用于病毒分离的材料包括病鸡的喉头分泌物和泄殖腔内容物（用无菌棉拭子蘸取）、气管、肺组织和肾脏等。将新鲜病料（组织块需磨碎），按1∶5～1∶10加入灭菌磷酸盐缓冲液制成组织悬液，离心取上清，加适量抗生素于4℃冰箱内反应2h～4h。然后接种于9～11日龄SPF鸡胚或非免疫健康鸡胚的尿囊腔内，37℃孵育36h～48h，取出部分鸡胚，收获尿囊液进行血清学或分子生物学检测，其余鸡胚继续孵化6d～7d，观察胚体的变化。如病料中有传染性支气管炎病毒，则部分鸡胚在接种后3d～5d发生死亡，胚体比同日龄正常鸡胚矮小，卷成球形，又称“侏儒胚”。羊膜及尿囊膜增厚，胚体充血。初次分离的野毒往往要经过鸡胚盲传2～3代后，才能见到明显和规律的鸡胚病变。此外，也可通过鸡胚气管环培养法分离IBV。

2.病毒干扰试验：IBV在鸡胚中能够干扰NDV-B1株（即新城疫II系疫苗株）产生血凝素，因此，可利用这种方法对IBV进行鉴定。具体做法是：取9～11日龄SPF或无母源抗体的鸡胚10～20只，分成两组。其中一组先通过尿囊腔内接种经无菌处理的病料，每只鸡胚0.1ml，另一组作为对照，不接种。孵化10h后，两个组同时经尿囊腔途径接种含NDV-B1株的鸡胚尿囊液，每只鸡胚0.1ml。继续孵化36h～48h后，把两组所有鸡胚置4℃冰箱内4h以上，然后逐只收获并测定尿囊液的血凝效价。若病料中确实存在传染性支气管炎病毒，则该组鸡胚有的血凝效价严重低于对照组的鸡胚的血凝价。整个试验要严格按上述规定时间去做，否则干扰作用就会减弱或消失。

3.对鸡胚致畸形检验：传染性支气管炎病毒能在10～11日龄的鸡胚中生长，用自然毒初次接种鸡胚，多数鸡胚存活，但随继代次数的增加，对鸡胚的毒力增强，到第10代时，可在接种后的第9天引起80%的鸡胚死亡。胚体的特征性变化是发育受阻，胚体卷成球形，脚变形压在头部，羊膜增厚，紧贴胚体，卵黄囊缩小，尿囊液增多，肾脏尿酸盐沉积。传染性支气管炎病毒也能在15～18日龄的鸡胚肾细胞（CEK）、鸡肾细胞（CK）和鸡胚肝细胞（CEL）上生长，经多次传代（6～10代）后，可引起较明显的细胞病变，表现为胞浆融合，形成合胞体及细胞死亡。

4.病毒中和试验：用病毒中和试验可对传染性支气管炎病毒进行定性和定量检验。试验方法有鸡胚（7～11日龄）法、鸡肾细胞培养法和蚀斑法3种。鸡感染传染性支气管炎病毒后约10d（疾病流行过后的恢复期），其血液内出现中和抗体，并可持续6～12个月。因此，对患病鸡群的检验，通常采双份血清样，第一次是在发病初期，第二次是在发病后2～3周。若第二次血清样抗体滴度比第一次高出4倍，即可诊断为鸡传染性支气管炎感染。

5.琼脂扩散试验：可用感染鸡胚的绒毛尿囊膜制备抗原，也可用聚乙二醇浓缩感染鸡胚尿囊液制备抗原，按常规方式完成试验，经24h～48h观察结果。此法特异性较强，操作方法简单而快速。鸡感染IBV野毒或接种弱毒疫苗7d～9d后就能检出沉淀抗体，并可持续2～3个月。一般认为雏鸡血清中和指数在3.17以上时，就能用琼扩试验测出沉淀抗体的存在，因此采用AGP试验对疫苗接种效果的监测有现实使用意义。

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