一起由测序分析纠正检测结果的案例

         为了确保检测结果的准确性，取脑、肺、脾脏等组织匀浆，适当稀释后接入长满单层的Marc-145细胞，孵育1h后更换维持液继续培养，4天收获第一代，冻融后继续接入细胞作为第2代，逐日观察细胞形态，直至第4天均未发现细胞空泡化等特征性病变（图3），收获第2代细胞培养液，PCR鉴定结果显示伪狂犬病原阴性。
        细胞培养检测结果：判定该样品为伪狂犬阴性。

图3  细胞培养观察图示（左：病料组 右：对照组）

        更正结果：
        根据测序分析、细胞培养结果，本次检测PCR扩增条带并非有效特异扩增，对病原检测结果及时纠正为：伪狂犬阴性。
        猪场送检病料，考虑到时效以及成本，通常使用PCR手段进行检测，即使用病原特异引物扩增目的基因，根据扩增条带是否符合预期判定阴阳性。测序即通过分析目的基因片段的碱基序列，评估病原特征、疫苗使用程序等后续免疫治疗工作，也是检验结果是否准确的直接方法。
        对于猪场病原检测，结果的准确性关乎病猪是否妥善治疗、猪场经济效益能否上升等关键问题，病毒、细菌都有其独特的进化谱系，本中心推荐对病原检出阳性样品进行测序，一方面对本场发病病原特征进行了解，针对性治疗；另一方面可有效避免检测误差。

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