时间：2014-03-08 点击： 次 来源：阳光畜牧网 作者：阳光畜牧网 - 小 + 大
4.3 病毒分离 用SPF鸡胚绒毛尿囊膜接种进行病毒分离，在实验室取死亡狐的病料,脑、肝、脾制成1∶4的悬液，经无菌处理后接种8日龄SPF鸡胚绒毛尿囊膜，每胚接种0.1～0.2 ml，接种10枚鸡胚，另取3枚鸡胚不接种病料做对照，在孵化器内孵化或在37.8℃温箱内培养，3天后观察5枚鸡胚的变化，见鸡胚出血,发育变小，尿囊膜水肿，在尿囊膜上有灰白色不透明物，7天后再观察5枚鸡胚的变化，鸡胚萎缩，皮肤出血，尿囊膜上形成菌落样物增厚似痘斑状，水肿。将绒毛尿囊膜用10%福尔马林保存，做病理切片观察病毒的形态。另将绒毛尿囊膜用研磨器研磨制成匀浆，用高速离心机高速离心后取沉淀物直接观察病毒的形态。 4.4 动物接种试验和病毒再分离取典型病例的脑、肝、胸腺、脾脏和淋巴结等病料，采用离心或抽滤及抗生素等方法进行无菌处理，再用生理盐水制成10%混悬剂。在80～100日龄的雪貂脑内接种0.5～1 ml,8～12天后,出现相应的临床症状,发病5～6天后死亡。取死亡雪貂的脑、肝、脾制成1∶4的悬液，按上法进行鸡胚接种和电镜观察，出现相同的鸡胚和痘斑变化及观察到相同形态的病毒。说明雪貂中分离的病毒与狐狸自然发病分离的病毒是完全相同的。 4.5 电镜观察 将绒毛尿囊膜做超薄切片和尿囊膜处理物进行病毒观察，都发现有犬瘟热病毒;在超薄切片中见病毒为球形、椭圆形、梨形、长杆棒状形、黄瓜形等，大小为100～600 nm，病毒具有双层囊膜，囊膜表面上有长1.3～2 nm的纤突，病毒颗粒内部有“峭样结构”。在尿囊膜处理物中表现为不规则形，直径大小为200 nm,纤突不明显。 4.6 间接免疫荧光抗体法检查犬瘟热病毒 从2例死亡狐狸的脏器(肝、脾、肺、膀胱等)中采集病料并做成冰冻组织切片，用间接免疫荧光法检查组织细胞中是否有病毒存在。根据判断标准，病毒阳性组织中呈现苹果绿色荧光，阴性呈现土黄色荧光。从2例发病狐狸制作的冷冻组织切片，经荧光抗体检测都出现苹果绿色荧光，表明在发病组织中都存在犬瘟热病毒。 5 防治 5.1 治疗 发现病狐应及时隔离，确诊，采取有效治疗措施。对于病狐用高免血清紧急治疗。皮下或肌肉注射2～3 ml/kg体重，最好每天1次，连用3次，务必选用质量好的高免血清，否则治疗不佳。用药物对症治疗，如使用退热、止痛、镇痉、消炎等药物，可减少死亡率。也可使用抗病毒药物如病毒唑，抗生素如氯霉素、青霉素、庆大霉素、卡那霉素、丁胺卡那霉素、先锋霉素系列药物等预防并发或继发细菌感染，减少死亡率。对于未发病的狐狸，应用疫苗进行紧急预防注射。 5.2 免疫和预防 狐狸应在春秋两季进行常规的预防注射，可防止本病发生。国内已研制出单苗、三联苗或多联苗，在实践中取得很好的免疫效果。幼狐6、8、14周龄时分别皮下注射3 ml，至少应于6周龄时和14周龄时各免疫1次。成年狐在4个月时免疫1次，间隔14天再注射1次，种狐在配种前15天内再加强免疫1次。免疫期为6个月。5.3 综合处理 对于养狐场对狐狸笼，应经常清扫粪便，对狐笼和水食槽等用具定期用消毒药消毒。严禁狐狸场中人员流动，尤其场外人员严格限制进入狐狸场。对于车辆和人员进入狐狸场时应注意消毒。防止野鼠进入狐狸场，消灭养狐场中的家鼠和昆虫等。 |
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