时间:2023-09-19 点击: 次 来源:猪业科学 作者:李坤林,李天芝 - 小 + 大
猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea viruse,PEDV)属于冠状病毒科、冠状病毒属病毒,是导致猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhe,PED)发生的病原,猪是唯一感染后发病的动物,该病发病急、高度接触传播、主要通过消化道途径传播的病毒病。临床表现为呕吐、腹泻严重,呈水样、严重脱水,最后死亡。该病无明显季节性,全年均有发病,寒冷季节发病率高。猪无论品种,日龄大小都能发病,猪越小症状表现越严重,1周龄内哺乳仔猪感染后可造成100%死亡。康复后的猪只能携带带毒很长时间,受应激的时候能再次排出病毒,最长排毒期能达2个月。PEDV主要通过水平传播,如消化道途径,发病多为急性,传播迅速,发病猪场短期内还能反复暴发。暴发PED的猪场,储粪池中5年内都能检测出PEDV核酸,病毒在储粪池中最长存活4个月,因此,猪场一旦发生PED,存在再次发病的潜在风险。1971年,英格兰报道了首例PED的发生,后世界多个地方都有该病报道,1978年,我国出现该病病例。自2010年起,PED在全国呈现暴发性流行,是造成仔猪大量死亡的主要因素之一,导致我国养猪业损失严重。 为了解鲁北地区PED的流行现状,从而为PED的有效防控提供一定的参考依据。2020年1月到2022年12月,笔者团队从鲁北区域采集368份样品,均来自腹泻猪只,分布于9个县的猪场,应用荧光RT-PCR检测试剂盒对样品检测,分别检测样品中的PEDV、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PRoV)等病原,分析PEDV样品单独阳性率及与其他病原的混感情况。 1、材料与方法 1.1 病料 共368份病料样品采自9个县不同猪场,均位于鲁北区域,采集时间为2020年1月到2022年12月,样品为疑似PEDV感染的猪肠道及内容物。 1.2 试剂盒 AxyPrep病毒核酸提取试剂盒,为杭州爱思进生物技术公司产品。PEDV、TGEV、RV三重荧光RT-PC核酸检测试剂盒和猪德尔塔冠状病毒荧光RT-PCR检核酸测试剂盒,均是由该公司诊断试剂事业部提供。 1.3 核酸制备 取采集的猪肠道及内容物样品,加入灭菌盐水,使得样品与盐水质量体积比为1∶10,研磨成混悬液,细心转速为6 000 r/min,时间为5 min,取离心后的上清部分,按AxyPrep病毒核酸提取试剂盒说明书操作,提取样品基因组核酸。 1.4 病料样品初步检测 按试剂盒说明书对制备的核酸进行PEDV、TGEV、RV、PDCoV等4中病原荧光PCR扩增检测,统计检测结果,分析PEDV单独感染及与其他病原的混合感染情况。 2、试验结果 2.1 疑似病料检测结果 从表1可看出,共从鲁北地区采集368份猪只样品,属于9个不同县,其中PEDV阳性样品148份,阳性率是40.2%。其中由3个县PEDV阳性比率超过平均值,从高到低排列分别为临邑县(73.3%)、沾化县(46.6%)、庆云县(43.2%)。PEDV在猪场发病多为这单一种病原引起,但也有同PDCoV、TGEV及RV混感的情况,其中PEDV单独阳性样品占总阳性样品量的85.8%(127/148),两种病原混合感染的样品,主要是PEDV和PDCoV混感,占阳性样品量的5.4%(8/148),对于3种病原感染的样品,只有PEDV、PDCoV和TGEV感染的病例,占阳性样品量的1.4%(2/148),没有检出PEDV、PDCoV、RV和TGEV 4种病毒都感染样品。
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