猪冷冻精液研究应用进展及问题分析与展望

另外，在配方中可能不同类型的糖发挥着不同的作用。其他保护剂是保护精子不受各种不良环境因素的危害和改善精子所处环境的理化特性而添加的物质，如缓冲剂（磷酸二氢钾、柠檬酸钠、三羟基甲氨基甲烷等）、抗氧化剂（谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化物酶、褪黑素、丁羟基甲苯等）、抗生素（青霉素、链霉素、庆大霉素等）等。尤其特别指出的是氨基－钠－十二烷基硫酸酯（Orvus ES Paste，OEP），该物质是一种表面活性剂，含有十二烷基硫酸钠（SDS）的复合物，OEP可防止低温对精子的损伤，对精子膜结构有保护、修补作用，能够提高猪冷冻精液解冻后精子活力、存活率及质膜完整率。关于OEP对精子保护作用的机理有两种假设：其一是OEP具有乳化类脂的作用，对精子膜结构中的类脂有稳定作用，降低或阻碍由冷冻保存所引起的似获能性变化；其二是OEP通过分散卵黄中的类脂物并形成聚合体使这些类脂物更易进入精子质膜，而不是直接作用于精子膜结构，即OEP发挥作用的前提必须有卵黄存在。目前几乎所有高品质猪冷冻精液稀释液的配方中均含有OEP和卵黄。

2.2.4 冷冻剂型

冷冻剂型指精液在冻前用不同的载体分装或冷冻成不同的形状。在冻精的发展历程中，研究人员尝试过制作颗粒冻精、塑料细管、玻璃安瓿、扁平袋等不同的冻精剂型。

各种剂型在制作、标记、冷冻、保存及应用等方面各有利弊。颗粒冻精制作简单，取用方便，但制作过程中容易受到环境的影响，不能完全做到洁干净卫生，而塑料细管冷冻精液可以克服这一缺点，另外由于细管容积小、管壁薄适于快速冷冻且冷冻均匀，在快速解冻时升温一致，提高了解冻后精子活力，进而提高了配种受胎率。细管冻精喷码清楚明确，可以进行详细记录，而且不易磨掉，避免喷码信息差错，防止系谱混淆；细管型冷冻精液可全自动机械化生产，能够做到剂量标准化，提高了生产效率。塑料/金属扁平袋质地非常薄、表面积大，可以在冷却过程中快速降温，在解冻过程中快速升温，其冻存效果方面不低于0.25?mL细管冻存，再加上可容纳子宫颈输精单次所用的5 mL精液（50亿精子），省去了解冻时汇集无数细管的操作，输精后产仔率和产仔数在可接受的范围内，该方法的缺点是精子利用效率不高，每次采精可配母猪的数量不多。随着子宫角输精技术的成熟，所需精子数量大大减少，可以使用容量更小（0.5～0.7 mL）的扁平袋来冷冻密度更高的精子，即“MiniFlatPack”（MFP）法冷冻精液，MFP冷冻不仅比冷冻液细管的冷冻更均匀，而且精子冷冻存活率更高，当使用宫内深部人工授精时，受胎率也不低于0.5 mL的细管冷冻。

现在国内外大部分的猪冷冻精液产品都采用0.5 mL的细管冻精，采用颗粒冻精占比例很小，其他剂型也很少使用。

2.3 猪冷冻精液技术研发、推广、应用中存在的问题我国猪精液冷冻保存技术在技术研发、推广及应用方面存在“三乱、三难”现象。

“三乱”首先指的是研发乱。长期以来，由于猪冷冻精液质量不过关，母猪受胎率和产仔数偏低，导致国内对猪精液冷冻保存技术的研发进展缓慢，对影响猪冷冻精液质量的各种因素缺乏系统性和持续性探索，对冷冻损伤机理研究不深入，缺乏与使用实践相配套的理论支撑。发表的猪冷冻精液技术相关数据凌乱，综述性文章多，且内容雷同，科研性论文少，成果不能应用于生产；其次是开发乱。企业开发的猪冷冻精液产品质量没问题，但在产品的推广中过分地宣传冷冻精液带来的经济效益，当效益达不到预期目标时，就会对猪冷冻精液产品甚至猪冷冻精液技术产生质疑，忽略了猪冷冻精液的优点是多种因素相结合的产物；三是应用乱。应用效果在企业宣传小群体验证时效果好，但实际大群体应用时效果差，售后服务人员指导使用效果好，客户独立使用效果差。

“三难”首先是冻精用种公猪筛选难。猪精子耐冻性的个体差异性很大，但常规的精液检测技术不能检测公猪精子耐冻性，用实际多点大群体输精工作量大、耗时长，不利于猪冷冻精液的商业化运营；其次是生产难。冷冻稀释剂不能自主配置，以外购为主，昂贵的专业猪冷冻精液生产设备也限制了中小规模猪冷冻精液生产的企业和个人的进入，全国能独立生产质量合格猪冷冻精液的机构屈指可数；三是应用难。在物流运输如此发达的今天，专业化的猪冷冻精液的派送尚未解决，只能大量采购后由生产企业专门送货，造成了冻精价格偏高，限制了生产应用。

3  展望猪冷冻精液

从唯物论发展观的角度来看，猪冷冻精液是猪精液保存技术的发展。而发展具有普遍性、前进性和曲折性。随着猪冷冻精液生产及应用技术的逐步成熟，未来猪冷冻精液应用将会得到逐步提升，也会成为国际和国内种猪遗传资源交流的重要手段。而极端情况的出现也会促进猪冷冻精液的应用。但公猪精液的抗冻性筛选、冷冻机制的研究、冷冻精液的生产体系、输精方法和推广体系等诸多影响因素仍需进一步完善。

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