时间:2023-03-13 点击: 次 来源:中国畜禽种业 作者:佚名 - 小 + 大
2.2 血清学检测 2.2.1 酶联免疫吸附试验 酶联免疫吸附试验(ELISA)是血清学检测方法中应用最广泛的检测技术,具有快速、灵敏、成本低、特异性高、准确性高等特点,适用于大规模样品的排查、疫病监测以及自动化血清学检测。一般情况下,国内外常用p30/p32、p54、p72、p73 等作为检测ASFV 抗体的蛋白,该方法可通过这些蛋白直接检测出较低或中等毒力感染猪抗体[37]。王彩霞等[39]以ASFV p72 蛋白为包被抗原,建立阻断ELISA 方法检测猪血清中抗ASFV p72 蛋白的抗体,对ASFV 阳性血清灵敏度最低为1∶128,具有较高的特异性、敏感性和良好的重复性。 2.2.2 胶体金试纸检测技术 胶体金试纸检测技术是将特异性抗原或抗体与胶体金结合,形成胶体金免疫复合物,胶体金聚集于检测线显色,通过观察显色反应,即可判定结果。该技术可通过目测法判断结果,不需要专业的仪器设备,具有操作简单,特异性、灵敏度高等特点,适合现场、基层、大规模排查或是生猪调运临场的使用[40]。张鑫宇等[2,41]于2014 年以非洲猪瘟p54 的重组蛋白为核心蛋白标记胶体金,再分别用葡萄球菌A 蛋白和抗p54 多抗作为检测线和质控线,按一定顺序制备非洲猪瘟p54 抗体胶体金试纸,建立了p54 抗体胶体金检测法,该试纸与猪的其他病毒抗体阳性血清无交叉反应,表明该检测法的敏感性和特异性高。 2.2.3 间接免疫荧光试验 间接免疫荧光试验是利用特异性抗体和样品中相应抗原反应,形成抗原抗体复合物,再用荧光标记的第二抗体与抗原抗体复合物结合,洗涤后在荧光显微镜下观察荧光。该试验敏感度高,但对试验条件及操作要求较高,常用于复核ELISA 检测中的可疑样品[24,37,40]。 3 小结 非洲猪瘟是我国重点防范的外来疫病之一,在全球已流行一百多年。自2018 年我国首次发生非洲猪瘟以来,我国生猪养殖业以及人们的日常生活都受到了严重的影响。目前尚无疫苗和药物可用于预防和治疗非洲猪瘟,因此,快速、有效、科学的诊断技术对非洲猪瘟防控尤为重要。该文从非洲猪瘟病原学、流行病学、临床症状及诊断技术等方面进行了综述,以期各个地区能根据实际情况,综合各种方法的优缺点,选择适当的方法进行检测。同时科研单位也应根据目前诊断技术的不足,加大力度研发更佳的诊断方法。 【参考文献】略 |
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