①可能存在引物二聚体，建议降低引物浓度或重新设计引物等方式优化。 ②可能是模板量过低，促使了引物二聚体的形成，建议提高模板量。 2）双峰，杂峰Tm在80℃之后  ①引物特异性过差导致非特异性产物扩增，建议Blast检查引物特异性或重新设计引物。 ②gDNA污染，可通过NRC进行确认。若NRC有Ct值，可重新制备模板。 2. 熔解曲线单峰但不尖锐  可能存在大小相近的非特异性产物，建议进行高分辨率琼脂糖电泳确认。 3.熔解曲线单峰但Tm值在80℃以前 推测未加模板，仅有引物二聚体的扩增。进行高分辨率琼脂糖电泳确认产物或重复实验。 4.熔解曲线峰型杂乱 
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