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湖南省永州市鸡感染 H7N9 流感病毒变异株的调查

时间:2017-09-08    点击: 次    来源:中国动物检疫    作者:禹小芳 邹玖零等 - 小 + 大

禽流感(Avian influenza,AI)是由流感病毒引起的禽类感染或疾病综合征。流感病毒属于RNA 病毒的正黏病毒科,其最显著的生物学特性是亚型众多、变异频繁。其分子机制涉及点突变引起的抗原漂移(Antigenic drift)和不同亚型毒株同源重组产生新亚型所引起的抗原转变(Antigenicshift)[1]。流感病毒根据两个蛋白抗原性的不同,可被分为 16 个 HA 亚型(H1~H16) 和 9 个 NA亚型(N1~N9),理论上流感病毒可组成 144 个亚型 [2]。高致病性禽流感病毒目前仅见于 H5、H7两个亚型。它们从水禽传给陆禽,经过几代传播以后,从低致病性演变成高致病性病毒。关于 H7N9流感病毒变异株分子特征、人感染后的临床症状已有报道 [3],但未见禽感染 H7N9 流感病毒变异株临床特征的报道。因此,研究禽感染 H7N9 流感病毒变异株的临床特征及变异株的来源,对重大动物疫病防控是有意义的。

1 材料与方法

1.1 病例来源

发病鸡来自湖南省永州市东安县端桥铺镇某一起鸡感染 H7N9 流感病毒变异株的调查养禽场。该禽场存栏蛋鸡 6 000 余羽,品种为海兰灰,320 日龄。至发病第 4 日,累计死亡 102 羽。分别随机采集 8 只发病鸡的咽 / 肛拭子及血液样品,备用。

1.2 流行病学调查

向养殖户、饲养员、防疫技术员询问关于鸡发病的相关信息,并对饲料、用药进行取证调查。

1.3 病理解剖

随机选择 8 只发病鸡进行临床解剖,对发病鸡的气管、心脏、肝脏、肾脏等器官进行病理解剖并拍照,做好记录。

1.4 实验室检测

1.4.1 检测试剂。禽流感病毒 H5(Re-6 株)、H7 亚型血凝抑制试验抗原(哈尔滨维科生物技术开发公司出品,批号 201605);禽流感病毒 H5/H7/H9 型实时荧光 RT-PCR 检测试剂盒(深圳生科源生物科技有限公司产品,批号 201506)。

1.4.2 检测方法。关于禽流感病原学检测,按禽流感病毒荧光 RT-PCR 检测方法(GB/T 19438.1—2004)。从样品中提取病毒 RNA 后,以实时荧光定量反转录 - 聚合酶链反应法(real-time RT-PCR)检测 H5/H7/H9 亚型核酸。关于禽流感抗体检测,按高致病性禽流感诊断技术(GB/T 18936—2003)进行血凝和血凝抑制试验,并记录相关数据。

1.4.3 数据处理。将有关数据录入 Excel 2003软件,通过 SPSS 13. 0 软件进行统计分析,使用GraphPad Prism 5 软件制图。

2 结果与分析

2.1 流行病调查结果

发病前 100 d,养鸡场实施过 H5 亚型流感疫苗和“H5+H9”联苗(广东永顺)免疫,饲养状况良好,并无其他烈性发病情况。发病后的前 4 天,分别死亡 10、18、31、102 羽(图 1);死亡的前几天,病鸡采食量、产蛋量无明显变化,外观正常;至濒死日,呈现明显的外观症状:精神萎靡、头部肿大、肉髯发绀、流泪、口流涎(图 2),也有部分鸡在采食过程中突然死亡。由于鸡发病迅猛,死亡快,无脚趾出血症状。

图 1 发病禽场日死亡数量

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