动物源性食品中有害化学物质及污染物的检测——孔雀石绿

王权等采用无色孔雀石绿单克隆抗体建立了水产品中孔雀石绿残留的间接竞争ELISA检测方法，无须将提取物中的无色孔雀石绿氧化为孔雀石绿再检测，简化了检测方法。结果表明，标准曲线呈线性相关，相关系数为0.9823，最适检测范围1~256ng/mL，检测限为1.29ng/mL，批内和批间变异系数分别为4.307%和4.566%，鳗肉样的平均添加回收率为90%~110%。采用ELISA试剂盒检测水产品中孔雀石绿的特点是：检测速度快，2~3h就可检测一批样品；灵敏度高，在鱼、虾中检测灵敏度可达到0.01μg/kg。该方法特别适合大批量样品的筛选。虽然ELISA法的抗原和抗体结合有较强的选择性，但水产品的种类繁多、基质复杂，检测结果易出现假阳性，因此用该方法检出的阳性样品还需用HPLC法或LC-MS法进行定量和确证。

有报道分子印迹技术用于孔雀石绿残留检测。分子印迹技术是指制备对特定分子具有特异识别选择性的聚合物的过程，它可以被形象地描述成制造识别“分子钥匙”的人工“锁”的技术。该技术制备的印迹聚合物具有亲和性和选择性高、抗恶劣环境能力强、稳定性好、使用寿命长等特点，已被应用于色谱分离、固相提取、分子印迹聚合物模拟抗体的药物分析、生物传感器、免疫分析等领域，并显示出广泛的应用前景。黄敏等采用分子印迹技术，以孔雀石绿为印迹分子、丙烯酰胺为功能单体、三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯为交联剂、吐温-80为乳化剂，在60℃水溶液下合成了孔雀石绿分子印迹聚合物，并研究了其分子吸附性能，为复杂样品中孔雀石绿的选择性富集及快速检测提供了一定的物质基础。

总体来说，采用LC-MS测定水产品中孔雀石绿残留量是目前主流的检测方式，其灵敏度可达0.5μg/kg，符合相关法规的要求。但对于低浓度水平的复杂基质，不同检测手段所得到的定性结果差异较大，单四极杆和离子阱质谱测定结果较难确证，而串联四极杆和ToF-MS的检测结果较可靠。但采用HPLC和LC-MS检测孔雀石绿残留，过程复杂，检测周期长，且检测过程会产生有机废液污染环境。因此，应加快研究开发ELISA法、ICT等快速检测方法，并建立相应的标准。对大批量的被检样品，首先采用免疫分析法进行初筛，对阳性样品再用HPLC法或LC-MS法进行定性和定量，避免二次污染。

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