肉牛长途运输诱发应激综合征的诊治（图）

摘要：为确诊引起新疆某基层团场长途调运西门塔尔后备母牛发病死亡的病因，通过临床剖解，结合常规细菌分离鉴定、PCR检测，对发病肉牛进行现场诊断和实验室检测确诊，证实引起此次西门塔尔肉牛发病死亡的主要原因是长途运输诱发的应激综合征，主要致病菌为巴氏杆菌和支原体，并伴有附红细胞体混合感染。针对病因和药敏试验结果，采取了抗菌消炎和对症治疗等措施，发病死亡情况由此得到有效控制。此病例的诊治为新疆地区长途调运牛只时，降低类似事件的发生提供了一定的理论基础和实践指导。

肉牛运输应激综合征（transport stress syndrome of beef cattle，TSSBC）俗称“烂肺病”，是指因长途贩运过程中出现多种应激原，如热、冷、风、雨、饥、渴、挤压、惊吓、颠簸、合群、调料、体力耗费、环境改变、潜在疾病等，导致机体抵抗力下降，病原微生物，如支原体、巴氏杆菌、肺炎球菌、大肠杆菌等趁虚而入，引起呼吸道、消化道乃至全身病理性反应的综合征候群，如体温升高、精神沉郁、食欲减退、被毛粗乱、咳嗽、气喘、流黏性或脓性鼻液、拉稀、血便、关节炎、结膜炎、极度消瘦，甚至衰竭死亡。在没有专业指导和提前预防的情况下，不同地区间调运的牲畜，经过长途运输到达目的地后，由于运输过程的多样性、复杂性等，会出现不同程度的发病。

2019年新疆兵团第十师某基层团场购自东北地区某地的12~14月龄西门塔尔后备生产母牛到场3~5d后集中发病，主要临床表现为体温升高（41.2~41.7℃）、精神沉郁、流涎、食欲废绝、反刍停止，继而腹痛、下痢、干咳、腹式呼吸，牛只临死前体温下降、呼吸困难；病程较短，一般为3~5d，发病率为25.11%（169/673），病死率为81.65%（138/169），多数为急性死亡，治愈牛只多数后期生长不良。本研究应用常规细菌分离鉴定、分子生物学技术和血清学技术，明确引起长途运输肉牛发生不明原因大规模死亡的病原因素，掌握运输应激诱发动物发病的临床特点和致病特性，为后续制定综合防控措施提供技术支撑和实践指导。

1 材料与方法

1.1 材料

病料与标准菌株。无菌采集病死牛心血、肺脏、肝脏、淋巴结等病料，-20℃冷冻备用。

引物合成。参照Townsend等、Hoelzle等、韩猛立等、徐淑菲等的方法，合成多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida，Pm），牛支原体（Mycoplasma bovis，M. bovis），牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus，BVDV），牛传染性鼻气管炎病毒（bovine infectious rhinotracheitis virus，IBRV）的扩增引物。引物序列及扩增片段大小见表1。

1.2 方法

 解剖和染色镜检。剖检病牛，将病料组织触片，如心血、肺脏、肝脏，分别进行革兰氏和瑞氏染色镜检，观察其形态特征。

 分离培养。将无菌采集的病死牛心血、肺脏、肝脏组织样品分别接种于营养肉汤，37℃恒温培养16~20h后，再接种于麦康凯琼脂平板、5%绵羊血琼脂平板，37℃培养18~24h，观察不同培养基上的生长情况、菌落形态及溶血情况。

 生化鉴定。挑取典型菌落进行分离纯化，联合应用常规生化鉴定与全自动微生物生化鉴定系统鉴定。

 支原体和相关病毒PCR鉴定。将肺脏组织参照文献报道的办法进行前期处理，应用PPLO固体培养基进行培养，挑取典型菌落进行特异性PCR扩增；对采集的病牛血液参照文献中的方法进行BVDV、IBRV的PCR检测。

 药敏试验。按照常规方法进行，使用杭州滨河微生物试剂有限公司生产的临床常用药敏纸片，采用纸片琼脂扩散法（K-B法）进行药物敏感性试验。

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