猪唾液用于疾病诊断的实用指南

一、唾液用于疾病诊断的常用方法

1、疾病监控

预后分析及唾液可用于动物疾病信号的监控，及评估猪群内的流行病原。预后分析 并不是一种诊断程序，因此唾液也不能用作排除感染的依据。

2、检测抗体

唾液样品可用于检测PRRSV抗体，血清学检查不适合用于普遍存在的病原，如PCV2。

3、检测病原RNA/DNA

唾液样品还可用于检测造成肺炎的病原，如猪肺炎支原体、PRRSV、SIV等，但这些病原在唾液中的存在并不一定与疾病相关。

二、动物选择

1、感染者：选择已表现出感染信号的动物。

2、无症状者：随机选择无症状的动物。

3、跟踪感染时间：同一动物进行两次取样，两次间隔2-4周。

4、检查感染状况：对不同年龄群的动物分别取样（如4、8、12、16、20、24周龄）。

三、取样数量

由于缺乏对唾液样品的诊断灵敏度的相关数据，最适样品大小目前还没有最终确定。样品数量取决于观察的单位，不能超过栏水平。

四、取样前准备工作

准备一条新的、干净的、原色棉绳，直径适合于猪场的大小和年龄。如断奶仔猪为1cm，生长育肥猪可为2cm。禁止使用合成纤维绳，因为它们的吸收唾液的能力不及棉绳。

绳子的长度取决于具体的固定的位置，如固定在天花板，则需要较长；如固定在栏壁，则长度较短。

一条绳子足够适用于10-15头取样猪。但是，如果栏舍内饲养猪只增加，则需增加取样绳的数量。

每栏使用一条新的棉绳。

准备一些灭菌的试管（5-12mL）用于储存收集到的唾液样品，确保试验无菌。

取样最好在猪只进食前或后的2小时执行，这样可提高猪只对取样绳的兴趣，提高取样效率。

五、取样技术

1、固定取样绳。在栏舍内选择一个位置固定取样绳，要保证栏内所有猪均可接触到取样绳。固定位置应干净，远离饮水和进食区。取样绳的低端应与猪站立时嘴的高度相平。如果同栏内分配多个取样绳，它们的位置应尽可能的分开。

2、取样绳放置时间为30min。如果发现试验猪对取样绳不够活跃，可延长至1小时。

3、小心取下取样绳，注意不要接触到地面。将取样绳内的唾液挤至一个干净的塑料袋或容器内。

4、将上述塑料袋剪开一个小口，将里面的唾液转移至准备好的无菌试管内。每个样品至少需要2ml。

5、收集后，如果发现试管内有明显的杂质，如饲料等，则需用离心机对样品进行纯化。离心速度为2000xg，10分钟。

6、在试管上标明取样栏舍、取样猪场、取样日期。

六、样品保存

在将样品送往试验室前，可暂时先将样品储存于冰箱内，但必需在1天送往试验室分析。如果不能，则应该将样品保存于–20至–80°C冷库。

七、送检

在送检前应确保你所选的试验室具备唾液分析的能力。常规血液、组织的分析方法并不适用于唾液。另还需附上相关的信息，如兽医姓名、猪场名称、发票信息、所取样品的动物种类和年龄、取样日期、取样数、样品类型、检测项目等。