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口岸截获猪肉肠的主要猪病病原核酸检测

时间:2019-09-10    点击: 次    来源:中国动物检疫    作者:李碧鹰 - 小 + 大

摘要:为了解非法跨境携带猪肉肠传播动物疫病的风险,对北京口岸截获的猪肉肠进行8种猪病病原核酸的检测分析。结果显示:282份样品中,猪圆环病毒2型(PCV-2}、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)以及猪细环病毒1型(TTSuVl)均有检出;除PRV阳性率较低外(3.9%),其余3种阳性率较高,均大于35%。这表明口岸非法携带猪肉肠存在传播多种动物疫病的风险,提示相关执法邵门应强化口岸动物检疫,降低授病传入风险。

根据《中华人民共和国禁止携带、邮寄进境的动植物及其产品名录》规定,(生或熟)肉类(含脏器类)及其制品,均属于禁止携带、邮寄进境物。从境外携带的动物产品,由于其原料信息、制作工艺不明,存在散播动物疫病风险,一旦接触易感动物,很有可能引起动物疫情。但近年来非法携带动物产品屡禁不止,给我国动物疫病防控带来巨大风险。随着猪肉及其制品国际贸易的发展以及进出境旅客的非法携带,猪病病原跨境传播风险也随之加剧。例如从2007年开始,非洲猪瘟从撒哈拉沙漠以南传遍整个东欧,2018年又从高加索地区传入亚洲多个国家,引起多国非洲猪瘟暴发和国际贸易限制。此外,近十多年来,频发的食品安全问题使得世界各国对食品安全十分关注。而一些猪病病原还会引起公共卫生问题,例如2009年的H1N1亚型猪流感,经溯源表明其来源于猪群中流行的毒株。

根据我国与其他国家的双边贸易协定规定,口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV),猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(porcinereproductive and respiratory syndrome disease virus,PRRSV),猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV),猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,  PCV-2),猪流感病毒(swine influenza virus,SiV,猪细小病毒(porcine parvovirus,  PPV,伪狂犬病毒(pseudorabies virus,  PRV),猪细环病毒1型和2型(torque teno sus virus 1 and 2 ,TTSuVl and TTSuV2) 8种病毒,被列为进出境可能通过猪肉传播的检疫对象。FMDV, CSFV和PRRSV为可严重危害养殖业的重大疫病,已被世界各国列为重点防控对象。而SIV, PRV, PCV-2,PPV以及TTSuVl和TTSuV2为分布范围较广的病原,从肉制品中检出的可能性较高。为了解非法跨境携带猪肉肠传播动物疫病的风险,从而为执法部门的监督管理提供数据支持,本文以北京口岸截获的猪肉肠为研究对象,选取282份样品进行了8种猪病病原核酸的检测分析。

1 材料与方法

1.1样品

样品均为口岸截获的猪肉肠核酸样品,-80°C冰箱保存。按照猪肉肠接收时间将样品分为“前段  (  2018年11-12月)、中段(2019年1-2月)和末段(2019年3-4月)”,从每个时间段样品中随机抽取94份,共抽取282份核酸样品。样品主要来自25个国家的航班,其中欧洲16个、非洲7个、亚洲2个,另有3份样品来源国未知。具体猪肉肠样品来源信息见表1。

表1 猪肉肠样品来源信息统计

来源洲 来源国数量/个 样品数量/份
欧洲 16 241
亚洲 2  30
非洲 7 8
未知 -— 3

1.2 设备与试剂

荧光PCR仪、Roche 480:美国Roche公司产品;AB QuantStudioTMS:美国Thermo Fishe:公司产品;病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒:天根生化科技有限公司产品;引物、探针:生工生物工程股份有限公司合成;M-MLV反转录酶、RNA酶抑制剂:Promega公司产品;Ex Ta犷Hot StartVersion,  dNTP;  TaKaRa公司产品。

1.3 检测方法

8种病原的检测方法主要是荧光PCR、荧光RT-PCR,均依据相关国际/国家标准或规范进行,具体见表2。

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