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西班牙专家:做到这些,就可以控制非洲猪瘟

时间:2019-04-04    点击: 次    来源:国际畜牧网    作者:José Manuel Sanchez-Vizcaino - 小 + 大

“ASFv基因组成结构非常复杂,普通的病毒DNA只有10~20kb(即Kilobase, DNA长度单位,表示病毒某段DNA分子中含有1000个碱基对),但ASFv的DNA有170~190kb。ASFv的DNA里面有腹膜细胞,使得耐受力很强,保护非常好,且它的变异性又很高,并不是单一的病毒,而是一个非常复杂的病毒家族。”桑切斯·斯凯诺分析说,“因此,研究ASF病毒家族,不能简单通过几个基因进行描述。换句话说,ASFv并不受某一抗体控制,如果只是采用单一抗体的药物,不能对它进行有效控制。另外,ASFv基因当中还有两个蛋白质非常复杂。”

“总体来说,如果仅从基因型来分析ASF病毒,是不管用的。”桑切斯·斯凯诺强调说,“对于ASFv来说,因为它的靶细胞是巨噬细胞和内皮细胞。巨噬细胞在机体整个免疫系统当中的作用非常重要,如果巨噬细胞受到了病毒侵蚀,机体免疫功能就会受到很大影响。另外,巨噬细胞在复制过程当中也会受到破坏。对于内皮细胞是另外一种情况,这就是为什么感染ASFv的猪会出现出血症状。”

桑切斯·斯凯诺介绍说,ASF临床表现主要有超急性、急性、亚急性,或者有时候没有任何明显症状,一旦出现不同问题需要采取不同的应对措施。在中国,大多数的ASFv感染病例属于急性-亚急性。通常,ASF急性-亚急性的症状主要包括:发烧、昏睡、厌食、皮肤出血以及循环系统、呼吸系统、消化系统出现问题并伴有神经失调,这些急性-亚急性的ASF临床症状与古典猪瘟(CSF)、猪丹毒症、沙门氏菌、放线杆菌、其他败血症、猪皮炎肾病综合征(PDNS)的临床症状非常类似,有时候容易混淆。因此,需要采集受感染猪只的样品进行实验室检测和诊断。比如,中国养猪规模如此大,很多时候ASFv携带了七八个月也没有暴发,甚至没有出血点,往往会被当成其他疾病。对应发烧、昏睡、厌食、皮肤出血这四个症状,如果发现猪只出现了其中3个症状,就要考虑它是不是感染ASFv,就需要取样进行实验室检测与诊断。有时候,可能过了几个月才在临床当中看到真正的ASF症状,这就是为什么它很难进行检测的原因。不仅仅是现场检测,包括和实验室合作取样,危险性高,因为操作不当ASFv可能传染给其他的猪。

“通常,急性ASF出现脾脏肿大的症状特别多,其次为淋巴系统病变。”桑切斯·斯凯诺说,在对2007年亚美尼亚感染ASFv的野猪进行病理检测发现,出现脾脏肿大的病例占比达到100%,同时还出现淋巴结肿大(94.12%)、出血性淋巴腺炎(88.23%)、胸膜积水(88.23%)、扁桃体出血(88.23%)、扁桃体化脓(52.94%)、肝肿大(88.23%)、休克肺(70.95%)、细支气管间质性肺炎(64.7%)、心包积水(70.59%)、心脏出血(47%)、肠道出血(76.47%)、派尔集合淋巴结坏死(35.29%)、肾脏出血(41.17%)等症状。他还强调称,对于野猪来讲,非常重要的一点,需要建立并完善早期检测体系,同时需要建立并完善应急计划。

桑切斯·斯凯诺认为,早期检测对于非洲猪瘟诊断非常重要。“这涉及早期检测率,虽然现在大部分实验室诊断非常好,但唯一的问题是在现场发现病猪之后,它的样品多长时间才能安全送到实验室。”他说,有时候,病毒血症会长时间存在,抗体也会存在好几年,所以需要进行长期的PCR(聚合酶链式反应)测试。

“抗体是ASFv的一个非常重要的感染标记物。在寻找抗原的时候,因为一些抗体与抗原会结合而成免疫复合物,尤其是直接用抗原剂诊断剂时,发现敏感度并不是那么高。所以,有时候需要用ELISA(酶联免疫吸附试验)或iELISA(间接酶联免疫吸附试验)对抗原进行检测。” 桑切斯·斯凯诺分析说,“如果PCR检测采用血清,敏感度并不那么高。但是,用全血更加敏感一些,因为有些病毒隐蔽性比较强。因此,做PCR检测一定要用全血。”

“对于ASFv检测样品组织而言,淋巴结很重要,还包括肺、肾、粪便以及脾虫,粪便里面有时也含血。ASFv检测中,很多时候主要看它的红血球吸附能力,还有红血球吸附为阴性的结果。但是,现在发现有些病毒不产生红血球吸附。因此,需要对它进行细胞病理效用的分析。” 桑切斯·斯凯诺说:“通常, PCR检测采用常规PCR或实时PCR。现在,更多采用第三种PCR方法——UPL-PCR(Universal Probe Library,UPL;UPL-PCR:实时定量探针库聚合酶链式反应)检测。从ASFv不同的检测结果来看,UPL-PCR最敏感。”

桑切斯·斯凯诺介绍说,在ASFv检测与诊断中,可以采用世界动物卫生组织的ELISA法来分析抗体,还可以通过实验室进行分析抗体。另外,还可以采用免疫印迹法来进行分析抗体,采用此法更容易识别出弱阳性样本。

“我这里还有很多ASF方面的数据和内容,我会发给主办方,大家可以参阅。”桑切斯·斯凯诺说,“我们还有ASFv检测笔,使用起来非常便捷,它在现场可以使用。我们还有视频,也有CD中文版,包括ASFv病原、流行病学、检测方法、诊断细节、疫苗开发等内容。”

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