非洲猪瘟防控及疫苗研发：挑战与对策

ASFV基因的命名具有一定规律性。用限制性内切酶EcoRⅠ对ASFV基因组进行消化，将切割所形成的片段以英文字母 (A、B、E、K、E¢) 进行编号，例如EP402R/CD2v基因，“EP”对应的是“E¢”，“402”表示该基因编码402个氨基酸，“R”表示基因读码方向朝向基因组3¢端，如果读码方向相反则用L表示。CD2v (Hemagglutinin) 是ASFV编码的与细胞CD2分子同源的蛋白，具有红细胞吸附功能。这种命名的优点是，可根据基因名称快速判断其所在的位置及编码蛋白的分子量。

ASFV基因组不具有感染性，复制机制与痘病毒相似。首先，在靠近发夹环部位引入一个缺口 (Nick) 形成单链，以打开的单链为模板合成互补链，分别形成2个发卡环结构；然后，以新形成的发卡环为引物进行子代链的合成，从而完成ASFV基因组的复制[10]。ASFV基因组复制主要发生在胞浆，但有一个短暂的入核过程，该过程可能对病毒的复制起始有着重要作用[10]。

1.1.2  ASFV基因型与血清群

根据p72 (B646L) 基因末端约500 bp核苷酸的差异，现已鉴定出24种ASFV基因型[11]。目前东欧及高加索地区流行的是基因Ⅱ型，西非地区主要是基因Ⅰ型，东非和南非则有20多种基因型。这种基因分型的优点是可以利用PCR技术快速地对ASFV进行遗传演化分析。其缺点是不能反映出病毒血清学特性，例如同是基因Ⅰ型的毒株，有的具有红细胞吸附特性，有的则没有。这种基因分型也不能很好地反映毒株的免疫学特性。为了解决以上问题，研究人员对1961年到2009年分离的32株ASFV进行了血细胞吸附抑制试验 (Hemadsorption inhibition assay，HAI)，将其中具有血凝特性的ASFV分成了8个血清群 (Serogroup)，也有少量未分群的ASFV[12]。随后血清群特异性嵌合病毒的免疫保护试验发现，CD2v和C型凝集素蛋白是重要的保护性抗原[13]。基于HAI的血清学分析需要活病毒和恢复期的血清，这制约了ASFV血清学研究的发展。

1.1.3  ASFV复制周期

ASFV主要感染单核-巨噬细胞系统，可利用巨胞饮或网格蛋白介导的内吞完成其入侵。当ASFV被包裹在巨胞饮泡或者内吞体内后，将经历从早期内体到晚期内体的成熟，同时解聚失去病毒囊膜。然后，病毒内膜与内体膜融合，释放出病毒核心。经脱衣壳 (Uncoating) 释放出的病毒基因组[14-15]在胞质中进行复制、转录和翻译。新合成的病毒蛋白与基因组在“病毒加工厂” (Viral factory，VF) 进行组装[16]。组装的病毒粒子借助动力蛋白运输至细胞膜附近，通过出芽的方式获得囊膜后被释放到细胞外[17]。这个过程中有大量病毒蛋白参与，如p54、p30、p12参与吸附和内化；pE248R参与膜融合；多聚蛋白pp220和pp62以及pS273R、p17、p72、pB438L、pE120R等参与病毒粒子的组装[7,18]；另外，还有约20种蛋白参与病毒基因组的复制及基因表达过程。

1.2  非洲猪瘟的流行与防控对策

家猪、各种野猪 (非洲野猪、欧亚野猪) 和钝缘蜱属软蜱为ASFV的宿主，其中疣猪等非洲本土野猪和部分钝缘蜱多为储存宿主。感染ASFV的家猪、野猪、软蜱、受污染的饲料猪肉制品以及器具 (车辆、衣服、靴子、注射器) 等[5]是该病的主要传染源。猪只主要通过直接或者间接接触传染源而被感染，也可经软蜱叮咬而被感染。病毒经血液传播至全身各组织脏器，引起猪只的全身性感染。已证实的ASFV传播循环主要有3种：1) 家猪-软蜱-家猪循环；2) 家猪-家猪循环；3) 野猪-野猪循环。ASFV在不同的循环内可以持续存在[5]。

非洲猪瘟最早发现于肯尼亚[19]，但非洲赞比亚东部省份奇帕塔 (Chipata) 地区在1912年也曾记载爆发ASF[20]。根据ASF全球流行情况，可划分为3个阶段：第一阶段是局限非洲地区流行，持续至今，主要分布在撒哈拉沙漠以南的非洲国家。第二阶段是第一次传出非洲跨洲际流行，发生在1957年到20世纪90年代之间。该阶段从1957年ASF传入欧洲的葡萄牙开始，后相继传入西班牙、意大利、法国、比利时等国家；1971年ASF传入加勒比地区的古巴、多米尼加、海地等国家；1978年传入南美洲的巴西；特点是长距离、跨区域传播，目前除意大利的撒丁岛外都被成功地扑灭和根除。第三阶段是第二次传出非洲跨洲际流行，从2007年传入格鲁吉亚、俄罗斯、白俄罗斯开始，2014年入立陶宛、波兰、拉脱维亚、爱沙尼亚等；2017年传入捷克、罗马尼亚等绝大部分东欧国家；2018年传入中国；目前，主要流行于高加索、东欧地区及中国，至今没有得到有效控制[21]。2018年9月13日比利时境内野猪发现感染ASFV，表明ASF疫情有可能已经蔓延到了西欧[3]。

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