薛青红，印春生，李宁，支海兵＊
（中国兽医药品监察所 国家牛瘟参考实验室 北京１０００８１） 小反刍兽疫（ＰＰＲ）又名小反刍兽伪牛瘟，是由小反刍兽疫病毒引起的一种急性、烈性、接触性传染病，易感群发病率高达１００％，暴发严重时死亡率达１００％。目前该病尚无有效治疗方法，主要通过早期诊断和疫苗免疫进行控制。１９世纪４０年代该病首次在科特迪瓦报道以来，先后在多个国家暴发和流行。２ ００７年７月，我国西藏地区先后发生４起ＰＰＲ疫 情，感染近５０００只羊 。西藏地区生活着多种珍稀野生动物，这些动物一旦感染ＰＰＲ，将造成巨大的损失。
目前我国在新疆和西藏地区采用疫苗接种的策略进行该疫病的防控，因此，深入开展小反刍兽疫活疫苗的效力研究对该病的预防和控制起着至关重要的作用。本试验拟以新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的６批小反刍兽疫活疫苗为基础，对其进行最小免疫剂量、疫苗免疫期和疫苗保存期的研究。
１材料与方法
１．１生产用毒种 ２００７０１批ＰＰＲ生产用基础毒种，中国兽医药品监察所提供。
１．２生产用细胞 Ｖｅｒｏ细胞，代次Ｆ１５１，中国兽医药品监察所提供。
１．３ＭＥＭ 细胞培养液ＧＩＢＩＣＯ公司生产（批号：４１５００－０３４）。
１．４试验动物 １岁以上山羊和绵羊。
１．５其他常规试剂均由中国兽医药品监察所提供。
１．６疫苗制造 按文献进行疫苗制造和质量检验，生产用基础毒种为２００７０１批ＰＰＲ毒种；生产用细胞为Ｖｅｒｏ细胞，代次为Ｆ１５７代；共生产小反刍兽疫活疫苗６批，批号分别为２００７００２、２００７００３、２００７００４、２００７００５、２００７００６、２００７００７ ，由新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产，经检验合格的疫苗用于效力研究试验。
１．７疫苗最小免疫剂量试验 将２００７００２、２００７００３、２００７００４ 批疫苗按文献规定的方法测定 ＰＰＲ 病 毒含量，根据病毒含量测定结果，将其稀释至每毫升 含 １０４ 、１０３ 、１ ０２ 、１０１ＴＣＩＤ ５０ 。每个剂量经颈部皮下免疫山羊和绵羊各５只，每只羊接种１ｍＬ。免疫后２１ｄ采血测定血清中ＰＰＲＶ中和抗体效价。
１．８疫苗免疫期试验 根据最小免疫剂量试验结果，选取２００７００５、２００７００６、２００７００７批疫苗进行疫苗免疫期试验。将小反刍兽疫活疫苗根据ＰＰＲ病毒含量检测结果，用稀释液稀释至每毫升含１个免疫剂量（１０３ＴＣＩＤ５０／ｍＬ），经颈部皮下免疫健康山羊和绵羊，免疫后１５个月和２６个月分别采血测定小反刍兽疫病毒中和抗体。
１．９疫苗保存期试验 将２００７００２、２００７００３、２００７００４批疫苗置 －２０℃保存１５个月后，按文献规定的方法 进行疫苗质量检验。 表１ ６批小反刍兽疫活疫苗的质量检验结果 
备注：“﹢”表示该项目检验结果为阳性，“－”表示该项目检验结果为阴性；病毒含量测定
结果为ＴＣＩＤ５０／头份；效力检验结果为小反刍兽疫病毒中和抗体效价
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