细菌培养与药敏试验方法及其在临床的应用

如果样本量为组织，用消毒后的镊子与剪刀制作新鲜无菌创面，使其于培养基上均匀涂布，或者用刀片刮取组织边缘，并涂布于培养基上；如果样本为液体或半流体，可用无菌棉拭子将液体混匀后蘸取液体均匀涂布于培养基上，当样本为尿液且需要对尿液进行细菌计数时，需对样本进行无菌稀释，然后再均匀涂布于培养基。需注意的是，所有样本，应先接种于无选择性培养基（血平板培养基），然后再接种于选择培养基（麦康凯培养基）或指示培养基。需注意培养温度、时间以及细菌生长所需的气体环境。

1.2.3  分区划线：

分区划线的目的是获得单个细菌菌落，用于观察细菌菌落形态，药敏实验以及生化细菌的鉴定。首先需在平板上进行标记（样本类型，接种时间等），采用多区域法进行划线（图2），每次划线前需对接种环进行灼烧，等待冷却后进行划线，划线的间距或次数取决于对样本细菌量的评估，划线时需保持接种环与平板的表面平行（图3），尽量不要刺破培养基。当细菌量被评估较少，或者在培养24小时之后进行纯化时，可以采取二象限划线法或四象限划线法（图4）。

图2 多区域划线法                                        图3 细菌接种划线方向

图4 二象限与四象限划线法

1.2.4 培养条件

除了培养基的要求，细菌的生长还需要考虑温度，培养时间，以及培养环境，大部分细菌可以在实验室常规培养条件下进行生长，一些苛性菌如一些分枝杆菌在改变某些条件的情况下也可生长，如表2，但是一些细菌，如立克次体，嗜血支原体，衣原体，在现有的条件下不能或者很难培养。

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