河北省兽医实验室理论考试习题（四）

2、 试述炭疽病的微生物学诊断方法。

答：疑似炭疽死亡动物的尸体，应尽快自末梢血管（耳尖、尾尖等）采血，涂片染色镜检，取血后应立即用烙铁将创口烙焦，以止血封口。由于病尸体内的炭疽杆菌暴露于空气中，接触了氧，气温又不适宜其生长时，就会形成芽孢，所以尸体严禁剖检。

（1）涂片镜检  取标本涂片进行革兰氏染色，发现有荚膜的呈竹节状排列的革兰氏阳性大杆菌，结合临床症状可作出初步诊断。陈旧病料可以看到“菌影”，确诊须做分离培养和动物接种。

（2）分离培养  取病料接种普通琼脂或血液琼脂，37℃培养18-24h，观察有无典型的炭疽杆菌菌落，同时革兰氏染色镜检。

（3）动物试验  将待检材料或培养物用生理盐水做适当稀释和磨匀后，皮下注射小鼠0、1-0、2ml,如为炭疽，多在18-24h因败血病死亡。剖检可见注射部位皮下胶样水肿，脾脏肿大。取脏器涂片镜检，如发现有荚膜竹节状大杆菌，可确诊。

（4）血清学试验  常用炭疽环状沉淀试验（Ascoli氏反应）。方法是：在一支小玻璃管内把疑为炭疽病死亡动物尸体组织的浸出液与特异性炭疽沉淀素血清重叠，若二液接触面产生灰白色沉淀环，即可诊断。

3、 口蹄疫病毒的分型及其对温度抵抗力特点？

答：口蹄疫病毒有7个血清型，分别命名为O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3以及亚洲1型。各型之间几乎没有交叉免疫力，同一型之间又有不同的亚型。我国流行的主要有O、A、C型。口蹄疫病毒在低温能长期保存，但易被热灭活。

4、简述鸡新城疫病毒的分离鉴定步骤。

答：（1）病料的采集和处理  可采集病鸡呼吸道分泌物、脾脏、血液、脑组织，按1：5的比例假入灭菌的生理盐水或缓冲液，用研磨器将组织研碎制成20%的悬液，反复冻融2-3次，5000r/min离心20分钟，取上清，用灭菌滤器过滤除菌或加抗生素杀灭病料中杂菌。

（2）分离培养  将处理好的病料经尿囊腔接种9-11日龄无母源抗体的鸡胚，37℃孵育，每天照蛋2次，弃除24小时内死亡胚，收集24 -96小时死亡胚，96小时内未死亡胚取出。

（3）收集鸡胚尿囊液采用血凝试验检查是否有血凝活性，对有血凝活性分离物应用标准的抗新城疫病毒，采用血凝抑制血清学试验对病毒进行鉴定。

确定为新城疫病毒后对病毒的致病性做进一步鉴定--致病性试验。

5、制备细菌培养基的一般程序有哪些？细菌培养基按照用途可分为哪几类？

答：制备培养基的一般程序包括：称量、加热、溶解、调酸碱度、过滤、灭菌、分装。

按照用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基和厌氧培养基。

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