河北省兽医实验室理论考试习题（四）

9、简述病毒鉴定常用方法

答：中和试验、补体结合试验、病毒的红细胞凝集和红细胞凝集抑制试验、荧光抗体试验、免疫酶标记技术和免疫扩散试验、聚合酶链式反应（PCR）和基因序列分析。

10、免疫血清学检测技术有哪些类型？ 

答：免疫非标记技术主要包括凝聚性反应（凝集试验、沉淀试验）、补体结合试验、中和试验（病毒中和试验、毒素中和试验）和免疫标记技术（标记荧光素、酶分子、金属颗粒、乳胶颗粒、放射性同位素等）。

11、凝集试验的特点何在？直接凝集试验与间接凝集试验有何异同？

答：细菌、红细胞等颗粒性抗原，与相应抗体结合，在有适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集团块，称为凝集试验。参与的抗体主要为IgG、IgM。凝集试验可用于检测抗原或抗体，优点是操作简便。

（1）直接凝集试验  颗粒性抗原与凝集素直接结合并出现凝集现象的试验称作直接凝集试验。按操作方法可分玻片法和试管法两种。

（2）间接凝集试验  将可溶性抗原(或抗体)吸附在不溶性颗粒载体的表面，与相应抗体(或抗原)作用，在电解质存在条件下，出现的特异性的凝集反应称为间接凝集反应。间接凝集试验敏感性高，比直接凝集反应敏感2-8倍。

12、简述疫苗的种类。

答：疫苗包括活苗和灭活苗、联苗与多价苗、寄生虫疫苗、类毒素、亚单位组份苗和基因工程苗。

13、简述作为菌种、毒种应具备的条件。

答：菌种、毒种是决定疫苗质量的最重要的因素。是国家的重要生物资源，一般的菌种、毒种必须具有良好的免疫原性和安全性、具有典型的生物学性状、血清型与疫苗使用地区流行的病原相符、遗传性状稳定、历史及有关资料清楚完整。

14、简述佐剂的分类及常用佐剂。

答：（1）不溶性铝盐类佐剂，主要是氢氧化铝胶，其次是明矾及磷酸三钙等。

（2）油水乳剂佐剂，此类佐剂最著名的有弗氏佐剂。

（3）蜂胶佐剂，蜂胶是蜜蜂采自柳树、杨树、栗树和其他植物幼芽分泌的树脂，并混入蜜蜂上颚腺分泌物，以及蜂腊、花粉及其他一些有机与无机物的一种天然物质。

（4）微生物及其代谢产物佐剂，如结核杆菌，破伤风类毒素和分枝杆菌细胞壁的一些成分等。

（5）人工合成佐剂，如海藻糖合成衍生物等。

（6）其他类型佐剂，如免疫刺激复合物佐剂、细胞因子类佐剂、非离子阻断共聚物表面活性剂佐剂、核酸及其类似物佐剂和左旋米唑佐剂等。

15、简述疫苗运输与保存应注意的事项。

答：疫苗的运输需注意防止高温、暴晒和反复冻融。活苗需低温保存。如放入冰瓶或冷藏箱内。北方寒冷地区要避免疫苗冻结或因温度高低不定而引起反复冻结和融化。切忌将疫苗装入衣袋内，以免因体温较高而降低效力。冻干苗应在－15℃下保存，如猪瘟兔化弱毒冻干苗在－15℃可保存一年。一些国家的冻干苗因使用耐热保护剂而保存于4-6℃。多数活湿苗只能现制现用，在0-8℃可短期保存。灭活苗可在2-15℃下保存。

D、问答题

1、论述当动物发生细菌类疾病时，请应用微生物学知识做出诊断，请详细写出诊断步骤。

答：（1）细菌的检验、形态检查：

取致死畜禽的组织或血液制成血液涂片或组织触片，经染色，然后在显微镜下观察，对于一些具有特征形态的病原体，可鉴别。

复染色法：如革兰氏染色法

（2）细菌的分离培养：

1）细菌的生长表现：在固体培养基上生长为菌落。表现：大小、形态、透明度、隆起度、度、湿润度，表面光滑、粗糙、有无光泽。在液体培养基：所有细菌能在其扩散生长。 表现：浑浊、沉淀、形成菌环、细菌膜等。

2）细菌的分离：用人工培养方法将细菌从病料或某一个菌落移植到新的培养基中培养分离出来，称细菌的分离。

（3）细菌的生化试验：

（4）动物试验：接种于动物，通过动物的症状、病理变化、染色、细菌培养、生物化学实验、免疫学技术，检验细菌。

（5）免疫学诊断：1）凝集试验、2）沉淀试验 、 3）补体结合试验。

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