3 结论
该工艺改进的理论依据为脾转移因子系淋巴细胞内一种多组分物质，以游离态存在于脾细胞内液及胞膜内，提取收得率高低主要取决于有效成分脱离胞膜、胞浆的吸附并溶解于溶媒内及从细胞膜内转移到透析液中，所以细胞膜破碎及溶媒的酸碱性是提取的前提，目前较为合理有效的细胞膜破碎技术是利用机械物理方法，结合温差骤变使细胞膜破裂，再加之低温下有冰存在，增强了细胞膜的脆性，降低了塑料应力，提高机械破碎率及粒度的作用。 3.1 一般说来，偏向碱性的提取液容易使活性成分变性，加上酶与其他物质的离子键结合，常能在酸性(pH 3～6)溶液中解离，所以酸性提取占多数。在酸性溶液中，还会发生细胞破膜作用，更有利于胞内物质提取，据报道[3]也有以pH 2的蒸馏水提取的方法。 3.2 温度对提取有很大影响，但在高温(10℃以上)时某些酶的作用会导致有效成分的损失，为使活性多肽充分溶解游离出来，反复冻融[4]是最简易的一种方法，切实可行。 3.3 透析总次数的影响。根据透析原理，透析内外液浓度达到动态平衡即宣告透析结束，即继续透析已无实际价值。多次透析是打破该平衡的简单有效措施。应该考虑，在透析时外液使用注射用水以创造对透析更为有利的条件(较高的浓度差)，此时应注意渗透压的终调节。 基于以上依据的改进工艺，在试生产中取得了良好的效果，这说明在提高猪脾转移因子含量、收率及活性，关键的步骤是在提取时使脾脏细胞破裂，活性多肽充分游离进入溶媒溶解。而反复冻融、酸性条件则是达到此要求的方法 。 生产工艺改进以后，不仅提高了转移因子的收率、含量及活性，而且为利用超滤技术制备高含量制剂提供了基础，降低了生产成本，提高了经济效益。 同时，猪脾转移因子的提取收率仍有一定提升空间，应进一步寻求最佳条件，创造环境，以利原辅料的利用并降低生产成本。 参考文献 1 冯来坤，黄超英，杨洪群，等.转移因子口服给药国内外研究进展.中国生化药物杂志，1999，20(5)：262-263. 2 曾学清，胡隆梅，谭邦青，等.猪脾乙肝特异转移因子的研制.中国生化药物杂志，1999，209(5)：239-240. 3 彭美英，王海沙，李波.正交试验法优化胸腺多肽的提取工艺.中国生化药物杂志，1992，3：22-24. 4 张旭东.小牛胸腺肽生产工艺改进.中国生化药物杂志，1996，17(6)：264-265.
|
