时间:2010-09-12 点击: 次 来源:中国养殖网 作者:阳光畜牧网 - 小 + 大
(二)冷冻精液的方法 根据不同冷源和分装方式,冻结方法有下列两类: 1.干冰埋藏法 。颗粒滴冻:是用干冰为冷源制作颗粒冻精的方法。在盛满干冰的容器中,用模板在干冰表面上压孔,孔径为0.5厘米,深2~3厘米。用滴管把平衡好的精液按0.1或0.2毫升的量滴入干冰孔窝内,再用干冰封埋2~4分钟后移液氮或干冰内贮存。 2.液氮熏蒸法 。(1)颗粒滴冻 在装液氮的容器上放一铜纱网,距液氮面1~3厘米预冷几分钟,把经平衡处理的精液按定量均匀地滴在纱网上过2~4分钟,待冻精颗粒变白时再收集到贮精瓶内,移入液氯罐中保存。滴冻过程中,可用消毒铝饭盒盖替代铜纱网。 (2)细管、安瓿分装 精液可采用颗粒滴冻的相同方法处理。 (三)解冻方法 细管、安瓿分装的冻精,可以直接在35~40℃的温水中解冻,只等细管或安瓿内的精液融化一半时,便可以从温水中取出来以备使用。解冻颗粒精液有干湿两种方法: 1.湿法解冻。 是在灭菌试管内注入1毫升1.9%柠檬酸钠解冻液,将试管在水浴中加热至35~40℃,取出颗粒精液 投进试管内,摇动融化以备使用。 2.干法解冻 。是直接将颗粒冻精置于灭菌试管内,然后在水浴中加热至35~40℃解冻即可。冷冻精液解冻后立即进行镜检,活力达到0.3以上的就可以用于输精。要提高冻精的受胎率,一般采用1:1的低倍稀释,40℃干法快速解冻,1亿左右有效精子数的大量输精和一个情期二次重复输精等方法。 三,超数排卵与胚胎移植 (一)超数排卵 促卵泡素(FSH)能促使卵泡发育,促黄体素(LH)能引起排卵,使用有这些功能的促性腺激素类似物处理繁殖母羊,使其在未经处理时每个情期中只排1~7个卵的基础上增加排卵数量,这就是超数排卵技术,简称“超排”。超数排卵处理可使母羊在一个情期内排出20个卵,个别母羊可高达50个卵。促使母羊超排的最佳时间是在发情周期的第12~13天,在羊颈静脉注射促卵泡素(FSH)200~300国际单位,静脉注射促黄体素(LH)100~150国际单位,可获得超排效果。还可以使用促卵泡素(FSH)的类似替代物孕马血清(PMSG)和 促黄体素(LH)的类似替代物绒毛膜促性腺激素(HCG),同样在母羊发情周期的第12~13天,根据体重大小皮下注射孕马 血清(PMSG)600~1100国际单位,出现发情表现后再注射绒 毛膜促性腺激素(HCG)500~700国际单位。如果没有孕马血清的制成品,可采妊娠50~90天期间的孕马全血注射,一般每毫升孕马全血含有50~200国际单位,由此可以推算全血用量。超数排卵的目的在于输精后能获得较多的受精卵,将其移植即可“借腹怀胎”形成新的个体,因此超数排卵只是胚胎移植的环节之一。 (二)胚胎移植 1.胚胎移植的意义 从一头母畜的输卵管或子宫内取出早期的胚胎(受精卵)移植到另一头母畜的输卵管或子宫内,让其“借腹怀胎”继续生长发育的过程就是胚胎移植,简称“胚移”。提供胚胎的畜体称为“供体”,接受胚胎的畜体称为“受体”。结合超数排卵技术,胚移可以迅速繁殖优良品种的后代,扩大纯种数量。胚移还可以扩大繁殖具有特种经济价值的家畜,如卡拉库尔羊羔皮经济价值很高,为此可通过胚移让其他种类的母羊怀胎生产卡拉库尔羔羊。还可以利用胚移技术将受精卵移植到家兔生殖道内进行长距离运输,然后再移植到母羊子宫内,这样可以减少胚胎损失,降低运输成本。 2.胚胎移植的技术环节胚移的主要技术环节就是收集胚胎和移植胚胎。 (1)收集胚胎 配种后3~8天内对供体母羊施行外科手术,在腹中线适当部位切开腹壁取出输卵管。从子宫角上端注射生理盐水或若干等渗生理缓冲溶液(简称冲洗液),并将冲洗液挤入子宫~输卵管连接部,为此在输卵管伞部插入直径2.5毫米的塑料管,用镊子固定输卵管,将冲洗液沿子宫至输卵管倒挤出来,用表面皿收集液体和胚胎。 (2)移植胚胎 接纳胚胎的受体母羊应和供体母羊一起做同期发情处理,使二者的发情时间相同或接近。移植胚胎的方法同样是在受体腹中线适当部位切开腹壁,找到排卵一侧的卵巢,如黄体发育良好,将胚胎注射到同侧子宫角上端或 输卵管壶腹内。目前,国外已可用非手术法进行胚移,只需在供体母羊腹部切一小口,利用内窥镜从供体母羊体内收集受精卵,然后移植到受体子宫即可。随着科学技术的不断发展进步,利用羊的繁殖生理原理, 在羊的繁殖过程中采用同期发情、冷冻精液、超数排卵与胚胎 移植及早期妊娠诊断等先进新技术,可以加快羊的繁殖和育种工作,大大提高了养羊业的生产水平和生产能力。 |
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