猪断奶后多系统衰竭综合征诊断技术研究进展

摘要：猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）是近年来发现的一种新的传染病，以渐进性消瘦、呼吸困难和体表淋巴结肿大为主要特征，能够严重影响猪的生长发育和引发多种疾病，已经给世界各地养猪业造成巨大经济损失，引起许多国家的高度重视。本病的病原为猪圆环病毒2型（PCV-2），单股环状DNA病毒，与另外3种动物病毒鸡传染性贫血病毒（CAV）、鹦鹉喙羽病毒（BFDV）及鸽圆环病毒（PiCV）同属于圆环病毒科（Circovirdae）。本文就近年来有关PMWS诊断方法的研究作简要综述。

1 临床症状和病理变化

1.1 临床症状

PCV-2主要侵袭6-16周龄仔猪，而8-12周龄的仔猪最常见。患病仔猪的典型临床症状表现为被毛粗乱，生长发育不良，渐进性消瘦。其他症状包括发热（40-41℃），扎堆，精神沉郁，食欲减退，衰竭无力，皮肤苍白。有时可见黄疸，呼吸急促或咳嗽，有的出现腹泻。体表淋巴结，特别是腹股沟淋巴结肿大。由于PCV-2能够引起免疫抑制，容易并发或继发其他致病因子如猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪流感病毒（SIV）、猪肺炎支原体、胸膜肺炎放线杆菌、链球菌等，从而在临床上呈现更为复杂的症状。

1.2 病理变化

最显著的病变是全身淋巴结，特别是腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、支气管淋巴结和下颌淋巴结肿胀2-5倍，甚至可达10倍。淋巴结切面硬度增大，呈均匀白色。如有并发或继发感染，则淋巴结可见出血、变性或化脓病变。肺脏病变也比较明显，肺肿胀，变性，表面有许多大小不一的橡皮状硬块。有的病例肝脏表面有白色增生花纹，有的病例呈现黄疸性肝炎。

1.3 组织学变化

淋巴结的皮质有单核细胞或巨噬细胞浸润，有时还散布着大量多核巨噬细胞。淋巴细胞减少，淋巴结基质常增生或有嗜酸性细胞浸润。淋巴滤泡中心部有蜂窝状坏死，其周围形成由组织细胞、类上皮细胞性巨细胞、多核巨细胞、淋巴细胞及噬酸性白细胞聚集的炎性肉芽肿。肺有轻度的多

灶性或高度的弥漫性间质肺炎。肺泡隔由于肺泡上皮细胞肿大、增生，水肿及细胞浸润引起显著肥厚，肺泡内有单核细胞、嗜中性白细胞及嗜酸性白细胞渗出。部分肺在支气管、血管周围发生淋巴细胞、组织细胞浸润，偶尔伴有多核细胞出现。

2 病毒分离

从PMWS病猪采取肺、肝、脾、淋巴结、扁桃体等组织，制成组织匀浆，用氯仿处理除去有囊膜的病毒，接种无病毒和支原体污染的PK-15细胞，利用氨基葡萄糖短时间处理感染细胞，以促进病毒的增殖。由于PCV不产生细胞病变，因此通常以PCR技术确定病毒的存在，用免疫荧光技术检测病毒的生长情况。PCV在PK-15细胞上多代盲传，才能有效增殖。郎洪武等用Dulac猪肾传代细胞分离到了两株圆环病毒。哈尔滨兽医研究所的崔尚金等（2003）从我国的22个省市分离到了32株猪圆环病毒，并对其中6株进行了测序，呈送到GeneBank。另外中国农大杨汉春等（2004）、华南农大罗满林等（2003）、南京农大姜平、陈溥言等（2003、2004）、华中农大陈焕春等（2002）也分别从各地分离到多株猪圆环病毒。

3 聚合酶链式反应（PCR）

PCR技术以其敏感、特异、快速、准确的优点成为目前病毒学诊断、分子生物学实验最常用的技术之一，也是PCV的病原检测和定型中最常用的技术。目前国内外已经建立了多种检测PCV-1与PCV-2的PCR技术。

R.Larochelle等建立了多重PCR方法成功检测PCV，并可对PCV定型，弥补了常规PCR检测方法的不足。他们根据PCV-1和PCV-2设计两对引物，一对扩增PCV-1的ORF1的349bp片段，特异性检测PCV-1。另一对引物特异性扩增PCV-2的ORF2上的263bp片段，可特异性检测PCV-2。用该方法检测发现，PCV-2不仅是PMWS的原发病原，而且也是猪繁殖障碍病、猪呼吸道综合征（PRDC）、仔猪震颤病的主要元凶之一。

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