细菌培养与药敏试验方法及其在临床的应用

2.3  对于药敏试验的影响因素

2.3.1 影响抑菌圈大小的因素

2.3.1.1 菌液浓度，一般制备成0.5麦氏单位的浓度，这样的浓度一般可达到使细菌菌落平铺在培养基上，便于结果判读。需注意的是菌液浓度越大，抑菌环出现越早、越小，反之越慢、越大。

2.3.1.2 培养基：一般使用WHO推荐的MHA（Mueller–Hinton agar）培养基，其厚度与PH都有一定的标准，比较有利于肉眼判读，能够满足大部分致病菌的应用需求，同时含少量的四环素、磺胺抑制剂，其含有的低胸腺嘧啶是与磺胺类药物竞争的物质，但也需要经常进行质量控制实验。

2.3.1.3 对生长条件要求较高的细菌，需加入营养增补剂，如测定链球菌属、肠球菌属细菌和脑膜炎奈瑟菌时需在MHA中加入5%脱纤维羊血。然而加入血液后，抑菌圈会比常规小2~3mm。

2.3.1.4 培养条件与时间，大部分细菌在35度培养16~18小时即可，但链球菌需要24小时。

2.3.2  对于某些细菌抑菌圈判读特殊要求

2.3.2.1 若抑菌圈内有独立生长的菌落，则提示可能有杂菌，需重新分离鉴定;

2.3.2.2 变形杆菌可能蔓延到抗生素抑菌圈内，明显抑菌圈内的薄膜样爬行可忽略不计;

2.3.2.3 某些细菌磺胺类药物的抑菌圈内可能有微量细菌生长，可忽略不计;

2.3.2.4 血平板培养的链球菌，对青霉素、苯唑西林、甲氧西林的抑菌圈会较正常小2~3mm。

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