疫病监测

如何采取和保存动物组织样品？

日期：02-29 作者：阳光畜牧网- 小 + 大

    发生动物疫病时，科学地采取病料是动物疫病诊断的基础，也是诊断检测工作的重要内容。所采样品的合格与否，直接影响实验诊断检测结果的准确性和可靠性。笔者根据多年的实验室工作体会，结合我市目前在采取动物组织病料中存在的一些问题（采样前准备不充分、采样不及时不规范、所采样品不符合检测要求、样品保存不正确、样品不贴标签、采样单填写不详细、没有采样记录等），就如何科学地采取和保存组织样品提出以下几点意见，供广大兽医工作者参考：
    1、做好准备工作
    组织病料的采取是一项严格的工作，采样前一定要做好认真细致的准备：
    （1）器具准备：要准备器械箱、灭菌棉签、棉线、胶布、封口膜、冰袋、标签、记号笔、采样单、记录本、手套、防护服等。
    （2）应用器械的消毒：刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30分钟，使用前用酒精擦拭，并在火焰上烧一下。器皿（玻制、陶制等）经高压灭菌（125℃高压30分钟）或干烤灭菌（160℃干烤2小时）或放于0.5%~1.0%碳酸氢钠水中煮沸10~15分钟，水洗后用清洁纱布擦干，保存于酒精、乙醚等份液中备用。也可使用一次性采样袋代替器皿。
    2、适时、规范采样
    应根据不同的（怀疑、估计）传染病，相应地采取脏器或内容物。采样应于患畜禽死后（不超过6小时）立即进行，或在濒死期采样。怀疑是炭疽时，采取患畜血液或脾脏（局部解剖）检查。
    （1）皮肤：取大小10×10cm2的皮肤一块，保存于10%福尔马林液中，或10%饱和盐水中，或30%甘油缓冲液中。
    （2）肠：用烧红刀片或铁片将欲采取的肠表面烙烫后穿一小孔，持灭菌棉签插入肠内，采取肠管粘膜或内容物；亦可用线扎紧一段肠管（约6cm）两端，然后将两端切断，置于灭菌器皿内。
    （3）脑、脊髓：可将脑、脊髓浸入50%甘油盐水中或将整个头部割下，包入浸过0.1%升汞（Hgcl2）液的纱布或油布，装入木箱或铁桶中。
    （4）内脏：将肝、肺、脾、心、肾等有典型病变的部位各采取2~3cm3左右的小方块，分别置于灭菌器皿中。供病理组织切片的材料，应将典型病变部分及相连的健康组织一并切取，同时尽量避免使用金属器皿。
    （5）淋巴结：动物体内的淋巴结一般都比较小，应将整个淋巴结剪下，放入灭菌器皿中。
     3、及时贴好样品标签
    每份样品都应注明组织名称、采取时间等，采取样品时最好由助手填写并贴好标签，以免采样完成后遗忘。
    4、做好详细的采样记录
    详细的采样记录是诊断检测的重要参考资料，采样记录至少应包括以下资料：①畜主姓名及场址；②畜禽场饲养动物种类及数量；③首发病例和继发病例出现临床症状的日期；④感染动物在畜禽群中的分布情况，发病率；⑤死亡动物的年龄、数量，死亡率；⑥临床症状及持续时间，免疫和治疗用药情况；⑦饲养类型和标准，包括饲料种类；⑧采样者的姓名、地址、邮编和电话；⑨采样日期。
    附：几种保存剂的配制法
    （一）30%甘油缓冲盐水溶液：纯中性甘油 30ml 氯化钠 0.5g 碱性磷酸钠 1.0g 0.02%酚红 1.5ml
中性蒸馏水加至 100ml 混合后，在15lb高压灭菌器中灭菌30分钟。
    （二）50甘油缓冲盐水溶液：氯化钠 2.5g 酸性磷酸钠 0.46g 溶于100ml中性蒸馏水内碱性磷酸钠 10.74g 纯中性甘油 150ml 中性蒸馏水 50ml 混合分装后，在15lb高压灭菌器内灭菌30分钟。
    （三）10%福尔马林溶液：取福尔马林10ml加入100ml蒸馏水即成。
    （四）饱和食盐水溶液：取一定量的蒸馏水加入纯氯化钠，不断搅拌至不能溶解为止（一般为38~39%左右），然后用滤纸过滤。

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