疫病监测

如何采取和保存动物组织样品?

日期:02-29 作者:阳光畜牧网- 小 + 大

    发生动物疫病时,科学地采取病料是动物疫病诊断的基础,也是诊断检测工作的重要内容。所采样品的合格与否,直接影响实验诊断检测结果的准确性和可靠性。笔者根据多年的实验室工作体会,结合我市目前在采取动物组织病料中存在的一些问题(采样前准备不充分、采样不及时不规范、所采样品不符合检测要求、样品保存不正确、样品不贴标签、采样单填写不详细、没有采样记录等),就如何科学地采取和保存组织样品提出以下几点意见,供广大兽医工作者参考:
    1、做好准备工作
    组织病料的采取是一项严格的工作,采样前一定要做好认真细致的准备:
    (1)器具准备:要准备器械箱、灭菌棉签、棉线、胶布、封口膜、冰袋、标签、记号笔、采样单、记录本、手套、防护服等。
    (2)应用器械的消毒:刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30分钟,使用前用酒精擦拭,并在火焰上烧一下。器皿(玻制、陶制等)经高压灭菌(125℃高压30分钟)或干烤灭菌(160℃干烤2小时)或放于0.5%~1.0%碳酸氢钠水中煮沸10~15分钟,水洗后用清洁纱布擦干,保存于酒精、乙醚等份液中备用。也可使用一次性采样袋代替器皿。
    2、适时、规范采样
    应根据不同的(怀疑、估计)传染病,相应地采取脏器或内容物。采样应于患畜禽死后(不超过6小时)立即进行,或在濒死期采样。怀疑是炭疽时,采取患畜血液或脾脏(局部解剖)检查。
    (1)皮肤:取大小10×10cm2的皮肤一块,保存于10%福尔马林液中,或10%饱和盐水中,或30%甘油缓冲液中。
    (2)肠:用烧红刀片或铁片将欲采取的肠表面烙烫后穿一小孔,持灭菌棉签插入肠内,采取肠管粘膜或内容物;亦可用线扎紧一段肠管(约6cm)两端,然后将两端切断,置于灭菌器皿内。
    (3)脑、脊髓:可将脑、脊髓浸入50%甘油盐水中或将整个头部割下,包入浸过0.1%升汞(Hgcl2)液的纱布或油布,装入木箱或铁桶中。
    (4)内脏:将肝、肺、脾、心、肾等有典型病变的部位各采取2~3cm3左右的小方块,分别置于灭菌器皿中。供病理组织切片的材料,应将典型病变部分及相连的健康组织一并切取,同时尽量避免使用金属器皿。
    (5)淋巴结:动物体内的淋巴结一般都比较小,应将整个淋巴结剪下,放入灭菌器皿中。
     3、及时贴好样品标签
    每份样品都应注明组织名称、采取时间等,采取样品时最好由助手填写并贴好标签,以免采样完成后遗忘。
    4、做好详细的采样记录
    详细的采样记录是诊断检测的重要参考资料,采样记录至少应包括以下资料:①畜主姓名及场址;②畜禽场饲养动物种类及数量;③首发病例和继发病例出现临床症状的日期;④感染动物在畜禽群中的分布情况,发病率;⑤死亡动物的年龄、数量,死亡率;⑥临床症状及持续时间,免疫和治疗用药情况;⑦饲养类型和标准,包括饲料种类;⑧采样者的姓名、地址、邮编和电话;⑨采样日期。
    附:几种保存剂的配制法
    (一)30%甘油缓冲盐水溶液: 纯中性甘油 30ml 氯化钠 0.5g 碱性磷酸钠 1.0g  0.02%酚红 1.5ml
中性蒸馏水加至 100ml 混合后,在15lb高压灭菌器中灭菌30分钟。
    (二)50甘油缓冲盐水溶液: 氯化钠 2.5g 酸性磷酸钠 0.46g 溶于100ml中性蒸馏水内 碱性磷酸钠 10.74g 纯中性甘油 150ml 中性蒸馏水 50ml 混合分装后,在15lb高压灭菌器内灭菌30分钟。
    (三)10%福尔马林溶液:取福尔马林10ml加入100ml蒸馏水即成。
    (四)饱和食盐水溶液:取一定量的蒸馏水加入纯氯化钠,不断搅拌至不能溶解为止(一般为38~39%左右),然后用滤纸过滤。

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