蓝耳病核酸检测九大误区

6) 检测就是疫苗毒，疫苗毒致病？

检测时机、测序区域、测序深度及宽度分析对于理解该问题非常重要。对于商品猪在免疫后的一定时间内检出疫苗毒株是正常现象；产房仔猪免疫弱毒疫苗（毒力特别弱的）会因母抗的存在检测阴性，但断奶后叠加应激因素会检测到阳性；在PRRSV暴发后采用闭群+群体免疫疫苗驯化+净化策略防控的猪场，2-3个月内检测出疫苗毒也是正常现象；对于实施疫苗阳性稳定策略的猪场，检测出疫苗毒也要客观综合分析。而这其中判定为疫苗毒的标准是什么？一般情况下，临床上只检测一个片段，比如ORF5检测分析为疫苗毒株，场内是否存在其它毒株？是否要检测其它区域？是否为重组毒株？净化过程中出现波动甚至失败，是死灰复燃（没压下去）还是重组出新毒株需要系统分析。对于苗猪，检测阳性的不一定难养，阴性的也不一定好养。疫苗毒的存在对本场是利是弊需要客观分析，降低猪群PRRSV的丰富度（中国动物检疫 | PRRSV-ORF5 PCR扩增产物的多样性分析），避免“新毒株”（与本场毒株不同就是新毒株）的进入和出现（重组）是降低PRRSV暴发风险的关键。

可参看如下数据，美国猪场测到的PRRSV序列多为疫苗来源（vaccine-like）

7) PRRSV毒株傻傻分不清？

经典、高致病性、NADC30/34、谱系、RFLP 1-4-4傻傻分不清。在我国，“经典”主要指1996-2006年期间流行于国内的毒株，以及包括由经典毒株为亲本的疫苗毒株，分子特征上无任何缺失；“高致病性”指2006年暴发的以nsp2基因上30个氨基酸缺失为分子特征的株；“NADC30、NADC34”均是分离自美国的毒株，其nsp2基因上分别缺失131、100个氨基酸，由于近年来国内分离到与其相似缺失模式的毒株，因此称为类NADC30、类NADC34（本实验室检测了大量ORF5序列，进化树分析与NADC34较近，但其nsp2区域并不是100个氨基酸的缺失，而这跟最初NADC34的标记缺失并不一致，因此是否为类NADC34毒株建议要对nsp2区域进行检测分析）。谱系是基于ORF5基因的遗传进化分析，RFLP是基于ORF5基因的多态性分析，比如，某毒株X属于谱系8，其RFLP模式为1-7-4。当前我国PRRSV毒株重组现象频繁，进行全基因测序基本找不到未发生重组的单一序列，“盲人摸象”似的病毒分类需要优化调整。

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