规模猪场洗消中心非瘟病毒检测预警的重要意义

今年养猪业面临各种原料上涨、猪价下跌和疫病发生风险高等多重压力，猪场要想持续发展必须做好转型升级、降本增效工作。而猪场安全，特别是猪场疫病的有效防控是发展的重中之重。近几年来，我国非洲猪瘟流行毒株呈多样性，临床表现也更加复杂，但非洲猪瘟早期监测预警是科学防控的前提和基础。下面我们就当前猪场的洗消中心如何做好非瘟检测预警进行探讨。

一、流行情况更加复杂

①病毒污染扩散，流行毒株变异

据中国动物卫生与流行病学中心等机构公开报道，2020年下半年，国内猪群非洲猪瘟病毒毒株已明显呈多样性，经典强毒株和变异株共存，变异株包括基因缺失株、自然变异株、自然弱毒株等。

②非瘟强毒株的临床表现

流行毒株的多样性，加大了非洲猪瘟临床表现的复杂性。非洲猪瘟强毒株临床表现为最急性和急性型：感染后通常3-5天就会表现出明显的症状，体温升高达42℃，精神沉郁，厌食，皮肤发红，耳、四肢、腹部皮肤有出血点，呕吐等，病死率极高。一般2-3天血液病毒核酸检测阳性，3-4天出现发热等症状，4-5天口腔及肛拭子样品病毒核酸检测阳性，6-10天左右感染猪大部分发病死亡；同居接触猪同样全部发病、死亡。同居猪只感染时间的早晚不同一般口腔拭子6天后、血液9天后、肛拭子10天后ASFV核酸阳性。非洲猪瘟强毒株感染、发病、排毒比较有规律，随着病程的发展，排毒量增加，Ct值减小。这也是非洲猪瘟早期检测和精准清除的基础。

③非瘟变异弱毒株的临床表现

变异株相比典型强毒致病力降低，但仍具有明显的残留毒力，同样具有很强的水平传播能力。这些变异株临床表现具有一定的隐蔽性，排毒量较低，也不规律，早期诊断困难，为我国非洲猪瘟防控带来全新的挑战。面对非洲猪瘟弱毒株的防控，猪场需科学认识、放弃幻想、严防死守，避免无妄之灾。

二、核酸检测方案优化

①根据当前非洲猪瘟流行的情况，在样品采集、检测重点、检测方法、检测质量控制等方面要进一步优化，严格控制。

②对于非洲猪瘟的防控最好是将病毒挡在场外面，猪场应减少场内外人员、物资进出的频次，强化人员、车辆、物资管理，有效消毒严格检测。

③场内也要做好环境的检测，对圈舍、仓库、药房等区域采样检测。每周对猪群进行病原和抗体检测。猪群转群、分娩、免疫等应激会促进非洲猪瘟病毒的复制，因此可以在猪群受到应激刺激后第2-3天内及时采咽拭子、尾根血、胎衣液等样品检测，以提高检出率。

④对可疑猪，按检出概率高低排序，依次采集深部咽拭子、淋巴结（微创采集）、前腔静脉抗凝血（EDTA）或尾根血、口鼻拭子。对分娩母猪，应采集脐带血、胎衣；对死胎和流产胎儿，应采集淋巴结、脾脏等组织样品。在采样的过程中一定要防止交叉污染。

⑤提高样品检测的准确性。（1）非洲猪瘟荧光PCR检测室应分为试剂准备区、样品处理区和核酸扩增检测区，各功能区间需物理隔离；（2）要规范处理样品，棉拭子要加生理盐水震荡浸泡，如果做混检，混样数量尽量不要超过5个；（3）要选择灵敏性高的核酸提取试剂盒，不同的提取试剂盒差异比较大，现在多采用磁珠法，用核酸提取仪自动提取；有条件时最好每次加一个阳性对照，对核酸提取的过程进行监控；（4）采用荧光PCR扩增试剂盒检测，可用P72单重荧光PCR，P72-CD2V双重荧光PCR或者P72-CD2V-MGF三重荧光PCR方法；可以适当增加荧光PCR检测的循环数，提高其敏感性；（5）一定要严控实验室污染，移液器用带滤芯的枪头，各区间的加样器不要混用，扩增检测后的PCR管严禁开盖，保持实验室环境的整洁和卫生，定期用84消毒液和酒精对实验室消毒。

⑥检测结果要和猪群生产数据、临床表现结合起来。非洲猪瘟的检测只针对采样时的状态，而疾病的发生、发展有一个过程；也可能因为采样质量低，实验室检测不规范，检测试剂盒不敏感，操作失误等出现假阴性；而实验室污染则可能出现假阳性。因此，当检测结果与猪群临床表现和生产数据等不相符时，要注意重新检测复核。

三、非洲猪瘟抗体检测

ASFV抗体在感染早期（7-10天）就可被检测到，并且会持续相当长的时间。而ASFV抗体阳性，是机体感染该病毒的最直接证据。抗体检测是病毒核酸检测的重要补充，通常用于引种检测，基因缺失毒株感染检测。目前，很多规模场已将非洲猪瘟抗体的检测列入日常监测项目。

总的来说，非洲猪瘟核酸和抗体的科学、及时、准确监测是猪场防非降本的重要技术手段。对于非洲猪瘟核酸阳性的猪群不要抱有幻想，即使是变异弱毒株，其对猪群生产成绩造成的影响也是无法估量的。当前，非洲猪瘟强毒株精准清除措施仍然有效。种猪场对于非洲猪瘟变异株的防控应更加严格，很多猪场发现时疫病已经扩散，因此，发现阳性猪舍，要做好整栋清除的计划；对阴性猪舍，可实施封场管理，但要做好相应线路规划和物理分隔；静默生产时间至少一个月。猪场应将非洲猪瘟核酸检测和抗体检测列入日常监测项目，一旦有异常情况，要及时采取相应措施。