非洲猪瘟诊断技术（图）

三、实验室诊断

PCR：非洲猪瘟的诊断通常通过核酸检测阳性和排除类似病变的其他常见病因来验证。最常见的是P72基因的PCR。肺、肾脏、脾脏、淋巴结、血清和血液都是PCR的优秀检测样本。口腔拭子和口腔液体也很常见，但病毒的数量比血液和组织中通常发现的要少几个对数，因此假阴性结果相当常见。PCR包括荧光定量PCR和常规PCR。常规PCR为基因测序提供了一条方便的途径。

如果使用基因缺失疫苗或意外引入基因缺失病毒株，核酸检测可能会在某些猪只中失败，因为产生的病毒数量比野毒低得多。然而，如果可以从组织或血液中获得良好的样本，可以对疫苗病毒的缺失基因进行核酸检测。在P72基因检测呈阳性后，可以对基因缺失疫苗进行PCR检测，寻找MGF 360–505 R和CD2v中的DNA，以确定问题病毒是野毒还是基因缺失疫苗病毒。

LAMP提供了一种快速、廉价、灵活且极其灵敏的核酸替代品，几乎不需要专业设备，且适合大规模检测，例如屠宰时的监测/筛查。

血清学检查可用于确定从感染到检测的时间过程较长，以至于病毒血症和组织中存在病毒的时期已经过去，或者如果没有良好的解剖样本，血清学可用于确定动物是否接触到ASF病毒。

有许多ELISA试剂盒可用于寻找 P 72、P 30 和其他 ASF 抗原抗体的存在。这种检测试剂盒通常用于识别和通常剔除故意或意外散毒于非法疫苗病毒的母猪群。

组织病理学检查显示，全身性血管炎伴梗死、出血和多器官血栓形成，尤其是肺、脾、淋巴结、肾脏、脑和肠道。淋巴结和脾脏中存在大量淋巴样破坏，肺泡巨噬细胞出现空泡。结肠上皮坏死和溃疡很常见（图4）。

图4 血管血栓形成、梗死、结肠粘膜溃疡

使用组织病理学来验证基因缺失苗的典型慢性病变是非常有用的。接受过ASF疫苗的猪通常具有慢性活性愈合和纤维化血管病变，包括肠道，肝脏，淋巴组织，心脏和肾脏中的血栓和梗死。淋巴结可能有出血，坏死和淋巴样破坏以及纤维化和愈合区域。接种疫苗的母猪群可能有大面积的肺坏死和纤维化区域，经常被误认为是慢性胸膜肺炎。疫苗毒可能不会杀死猪，但猪通常无法清除疫苗毒。

PCR是一个很好的工具，但并非万无一失，而且相对于实际的猪场情况，它不是100%准确的。这并不是说PCR不可靠。相反PCR结果仍然是主要的诊断依据。临床兽医是一名“侦探”，应该使用他所掌握的所有工具。当怀疑非洲猪瘟时，要一如既往地重视生物安全。也有几种非洲猪瘟相似疾病，在非洲猪瘟诊断阴性后，还需要对病情的实际原因进行诊断，这可能需要更多的临床观察干预。而不是通过锁孔切口突出腹股沟结节或脾脏。

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