时间:2022-01-20 点击: 次 来源:中农威特 作者:李永霞 - 小 + 大
2、Ct值 给荧光强度设定一个检测阈值,即所需测量的荧光的强度超出背景荧光强度的临界点(也就是Ct中的t,threshold),当需要测量的荧光强度超过这个阈值时,这个时候跑了多少个循环(Ct中的C,circle),那么对应的Ct值就为多少,如果跑了25个循环,那么Ct值就是25。 当原始样本中目标DNA含量越多,则达到这个临界值所需要的循环次数越小,所以Ct值越小意味着,原始样本中这种DNA的浓度越高。通常实时定量PCR跑40个扩增循环,Ct值小于29被认为是强阳性,Ct值在30-37之间认为是阳性,Ct值在38-40则可能是含有最小量的目标DNA,也可能是环境污染。
四、口蹄疫灭活疫苗中146S抗原与Ct值之间的相关性 根据口蹄疫病毒被BEI灭活的机理、146S抗原的特性以及RT-PCR的原理来理论推测灭活疫苗中146S抗原含量与Ct值之间的相关性较弱。为进一步验证146S抗原含量与Ct值之间的相关性,中农威特公司技术服务部组织相关试验,探究二者之间的关系。 (一)试验用疫苗 选取A、OA、O型病毒液三种,分别做稀释,成为不浓度146S抗原的病毒液,然后乳化制成10种146S抗原含量高低不同的口蹄疫灭活疫苗。 (二)146S抗原测定 采用蔗糖密度梯度离心和液相色谱法相结合的方法检测10种试验用口蹄疫灭活疫苗的146S抗原含量。 |
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