时间:2021-09-25 点击: 次 来源:中国兽医发布 作者:曲志娜 赵思俊等 - 小 + 大
6.3 快速检测法 氨基甲酸酯类农药的作用机制与有机磷农药相同,其基本原理是两类药物均能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性,造成神经传导介质乙酰胆碱的累积,影响正常传导,使昆虫中毒致死。氨基甲酸酯类农药的快速检测常与有机磷农药同时进行,主要利用其对乙酰胆碱酶的抑制特性。周华英等制订的浙江省地方标准(DB33/T 335—2001)利用有机磷类或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的抑制特性,设计合适的底物,使其产生颜色变化。蔬菜样品被剪碎后,用等量的水浸泡10min,将速测卡的试纸端泡入水中10s后取出后翻叠贴紧,白色面朝外,3~5min观察结果。如果蔬菜中有有机磷或氨基甲酸酯类农药存在,则抑制胆碱酯酶的活性,速测卡不显色;反之,显蓝色。该方法使用极为方便,适合在市场或田间进行即时监测,但番茄、紫包菜、葱蒜类不适合用此方法检测。 高晓辉等制订的农业行业标准(NY/T 448—2001)也是利用有机磷类或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的抑制特性,取适量浸泡过蔬菜样品的缓冲液,加入丁酰胆碱酯酶和显色剂(碘化硫代丁酰胆碱),37~38℃下反应30min,加入底物,用分光光度计测定吸光值随时间的变化值,计算出抑制率,判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留情况。即∶
如以乙酰硫代胆碱为底物,活性正常→样品中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药在乙酰胆碱酯酶的作用下乙酰硫代胆碱水解成硫代胆碱和乙酸,硫代胆碱和二硫双对硝基苯甲酸产生显色反应,使反应液呈黄色,在分光光度计410nm处有最大吸收峰,用分光光度计可测得酶活性被抑制程度(用抑制率表示)。抑制率大于70%时,表示蔬菜中含有某种有机磷或氨基甲酸酯类农药残留。 |
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