奶牛结核病的检测方法及注意事项

摘要：本文是笔者通过在规模奶牛场开展结核病检测，发现检测过程中存在问题，总结出了自己的观点和看法，提出建议。仅同仁供大家参考。

结核病的发病特点病原菌在肺部组织中寄生形成结节，随后变为干酪样坏死，形成空洞。患牛渐进性消瘦、衰弱，除肺部外，还有乳房结核、淋巴结核、肠结核等。结核杆菌按其致病性可分为人型、牛型和禽型，但各型之间可相互感染，人可通过空气及食用被污染的牛奶或其它食物而被感染。

近年来，随着人民生活水平的不断提高，人们日常膳食结构发生了重大变化，对肉、奶、蛋等主要畜产品的消费需求不断增长，但随之而来的畜产品质量安全事件却时有发生。如四川省资阳市出现的人感染猪链球菌病事件、河南双汇集团的“瘦肉精”事件、三鹿奶粉的“三聚氰胺”事件以及鸡蛋苏丹红等事件，以及媒体报道的种种事件，这些事件使人们对畜产品的安全越来越关注，群众对自身的健康认识指数得到了提升。作为一名畜牧工作者，总是保持一颗对工作对社会有锐性的心，时时刻刻都在关注群众舌尖上的安全，本文主要通过对有关规模牛场结核病检测，从检测前准备、操作流程、注意事项等方面提出自己的一些心得或见解，同时，根据工作实践提出意见建议。

1、检测前准备

1.1 人员准备

根据《动物防疫法》、《乳品质量安全管理条例》等法律法规的规定，按照《乳用健康标准》、《牛结核病防治技术规范》、《布鲁氏菌病防治技术规范》的要求，为了进一步加强奶牛结核病、布病防控工作，我县畜产局及畜牧兽医工作站领导对此项工作非常重视，及时安排部署，由县畜牧兽医工作站在县、镇兽医站抽调相关技术人员组成3个工作组，每组由5名人员组成，其中，1名县站人员，4名镇畜牧兽医站人员。在检测工作中，我带领镇畜牧兽医站抽调的4名人员，承担5个规模牛场的检测工作，接到任务后，本小组及时细化任务，对每个操作环节都固定专人，即登记一人，润毛、剃毛一人、测皮一人，注结核菌素一人，采血一人，牛只保定由检测场自行安排人员，利用5-6月1个月时间，对全县15个规模奶牛场集中开展“两病”检测工作，检测范围主要是三月龄以上（断奶后）的奶牛。

1.2 材料准备

1.2.1 试验必备材料：手术刀柄或剃须刀架、手术/剃须刀片、游标卡尺，酒精消毒药棉、镊子、0.9%生理盐、结核菌素（2-8°C保存）、1毫升皮试注射器、托盘。

1.1.2 人员防护材料：一次性防护服、口罩、鞋套、手套。

1.3 方法准备：结核病检测的方法有多种，如ELISA、PPD试验、细菌学培养、PCR技术及金标记抗体检测等方法。本文试验采用牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验，它是当前国际国内普遍使用的牛结核病诊断方法。我国农业部《牛结核病防治技术规范》将牛型结核分支杆菌PPD皮内变态反应试验规定为牛结核病确诊方法之一。GB/T 18645-2002(《动物结核病诊断技术》)规定,用牛型结核分支杆菌PPD皮内变态反应试验检出的结核病可疑牛,应立即在对侧颈部用同一批号试剂再进行一次试验。

2、现场检测

2.1 操作流程

2.1.1 保定: 用站立保定的方法，检测牛只保持正常站立姿势，在用绳子将头部统一向左侧牵引固定。

2.1.2 剃毛：用剃须刀或手术刀，在检测牛只颈侧中部上三分之一处剃毛，直径约10cm左右，形状呈正方形便于以后量皮。

2.1.3 测量：用左手将检测牛只皮肤提起，用游标卡尺测量术部中央皮皱厚度，然后读数，并做好记录。注意，术部应无明显的病变。

2.1.4 消毒：消毒时用75%的酒精棉球，从牛只检测区域部位正中开始，由里向外扩散划圆搽拭，用托盘接下掉落的牛毛及消毒棉球等废弃物，以免牛只误食引起消化方面的疾病。

2.1.5 注菌：牛只不论大小一律进行皮内注射0.1ml（含2000IU）结核菌素。即将牛型结核分枝杆菌PPD稀释成每毫升2万IU后，皮内注射0.1ml。注射后局部应出现小疱，稀释后的结核菌素注入到术部的中心位置，冻干PPD稀释后当天用完。

2.1.6 观察：皮内注射后经72h判定，仔细观察局部有无热痛、肿胀等炎性反应，并以游标卡尺测量皮皱厚度，做好记录。对疑似反应牛只应立即在另一侧以同一批PPD同一剂量进行第二回皮内注射，再经72h观察反应结果。对阴性牛只和疑似牛，于注射后96h和120h再分别观察一次，以防个别牛出现较晚的迟发型变态反应。

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