非瘟弱毒如何早发现、早控制？精准剔除大有门道！

经过3年的实践和探索，生物安全已经渗透到猪场管理和运营的各个环节，养猪行业对于生物安全的认识也在不断进步和革新。5月16日，在第二届中国畜牧业生物安全大会圆桌论坛环节，7位业内知名专家、养猪人和企业代表共同探讨了“生物安全的经验与教训”。

嘉宾：

仇华吉（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所研究员）

刘艳书（湖南新五丰股份有限公司总经理）

唐堇芾（万年鑫星农牧技术总监兼养猪事业部总经理）

王科文（硕腾（中国）猪事业部技术总监）

于高水（山东鲁抗舍里乐药业有限公司技术总监）

谢世峰（江西达葆维生物技术有限公司总经理）

吴正宏（沃华生物猪苗事业部总经理）

1. 做好非洲猪瘟的检测是实施生物安全的重要一环，在非瘟检测中如何避免假阴性？在非瘟弱毒株早期检测诊断上是否有经验可以分享？

仇华吉：检测结果出现假阴性，主要是因为检测方法敏感性不够、采样不当或样品中可能有干扰因子。猪场可以通过比对试验进行试剂盒遴选。现在国内比较好的试剂盒的敏感性可以检测出1个拷贝。此外，样品不适宜、采集时机不当或样品本身有抑制扩增因素，也会导致假阴性。建议尽量采集各类样品，特别是容易检测到核酸的样品。非洲猪瘟病毒首先通过鼻咽途径排毒，所以咽拭子是比较好的样品。母猪比较容易感染非洲猪瘟病毒，建议采集脐带血、生产过程中的阴道拭子，这些样品都是比较容易检出的。除了样品，对高度疑似的猪可采取血液样品，或者通过穿刺采集淋巴结或者肺脏样品（此方法对猪只应激过大，应慎重使用）。无论是强毒株还是弱毒株，淋巴结的检出率都是相对较高的。特别是弱毒株，从肺脏样品中也相对容易检测出来。另外，实验室质控、操作人员规范性、试剂盒质量、样本的保存运输和提取以及设置必要的阳性、阴性、内参对照等也非常重要。

王科文：检测拷贝数比较低的样本建议选择质量好的试剂盒，以及增加PCR循环数，我们一般增加到45个循环。另外，针对可能拷贝数比较低的样本还要做平行样，即一个样本做2次。比如出现有一个38或41个循环左右起峰，一个没有起峰，那么可能要重复再做。如果两个样差不多都在41、42个循环左右起跳，那么我们认为还是阳性的。

刘艳书：避免假阴性，首先选择的试剂要敏感，第二采样要准确，第三样本不能过度稀释，第四运输过程中避免降解，第五实验室操作过程要稳定规范。关于非瘟感染早期发现，可以通过淋巴结穿刺的方法来检测，检出率比较高。如果把检测环节的细节做到位，应该是可以对非瘟防控起到很好的作用的。我们每头出栏猪检测成本大约在8元左右，目前看来是防控非瘟非常好的有效途径。没有检测、没有拔牙就没有中国的养猪业，目前技术已经非常成熟。我们每个猪场日常设置了必检项，所有进出的人、物资、车辆，都要采样，关键环境要采样，异常猪要采样。并不是发生了非瘟才做检测。另外，个人认为弱毒真正影响还不是很大，主要还是野毒株比较厉害。

唐堇芾：假阴性对猪场危害非常大，也是生产过程中经常遇到的。如果猪出现疑似症状我们哪怕检测到是阴性，也会要求隔天采样检测直到采食量完全回复正常。对死亡的猪一定要采淋巴结、尾根血检测。如果只是采食量出现异常，会采唾液样、口鼻拭子、尾根静脉血检测，如果治疗效果确实不好，还会测抗体。总之因为再好的试剂盒也会有假阴性现象出现，我们会采取各种方式排查假阴性，减少对生产上产生的困扰。

于高水：首先，实验室操作规程一样，操作人员不一样，结果也会千差万别，所以人员素质非常重要；第二，对采样要求保证准确性，样品清洁度也要注意；第三，对CT值的把握，不同浓度拷贝数呈现出来的阴性和阳性是不一样的，浓度低的时候甚至近50才会起峰；第四，后续操作和数据处理可能也会有假阴性出现。

2. 猪价下降是最近养猪业比较关注的事。猪场在降低成本和完善生物安全方案上如何做抉择？

吴正宏：针对规模场和集团客户，生物安全上较高的长期硬件投入其实早期已经投入进去了，后面再考虑降成本可能会适得其反。

谢世峰：生物安全应该是针对所有病原微生物的，它们之间会相互影响。另外饲料营养与免疫水平相关，做好饲养营养对提高猪群抵抗力健康度有显著作用。

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