2.4 酶法提取 酶法提取是利用酶反应较温和地将植物组织分解,从而可以最大限度从植物体内提取有效成分。纤维素酶用于以纤维素为主的中药材提取有效成分能提高有效成分的收率。酶法提取要求酶有极高的活性、高度的专一性和温和反应条件。在植物药用成份提取中酶可以作为浸提辅助剂,在动物药提取中可以作为激活剂和脱毛剂等,可以作为提取液的澄清剂和药渣再利用的催化剂。酶法提取的效果主要取决于酶的种类、用量、酶解时间、温度、酸碱度、物料细度、搅拌等多种因素。酶法提取要拓宽其应用领域,还需要进一步深入探讨酶的浓度、底物的浓度、温度、酸碱度、抑制剂和激动剂等对提取物有何影响。 2.5 半仿生提取法 半仿生提取法(SBE)是从生物药剂学的角度,模拟口服给药及药物经胃肠道转运的原理,为经消化道给药中药剂设计的一种新的提取工艺。它应用于中药提取中坚持了“有成分论,不唯成分论,重在机体的药效学反应”。这种新提取法可以提取和保留更多的有效成分,能缩短生产周期,降低成本。但SBE的有效成分利用率较低。 3 分离纯化技术 传统的分离方法主要有沉降、过滤、离心,传统的纯化方法主要有水提醇沉法(水醇法)、醇提水沉法(醇水法)、酸碱法、盐析法、离子交换法和结晶法等。目前新的分离纯化方法主要有絮凝沉淀法、大孔树脂吸附法、超滤法、高速离心法等。 3.1 絮凝沉淀 絮凝沉降是在混悬的提取液或提取浓缩液中加入一种絮凝沉淀剂以吸附架桥和电中和方式与蛋白质果胶等发生分子间作用,使之沉降,除去溶液中的粗粒子,以达到精制和提高成品质量的目的。目前使用的絮凝剂主要有鞣质、明胶、蛋清、101果汁澄清剂、ZTC澄清剂、壳聚糖等。 在絮凝沉淀过程中可以加入交流电场或直流电场强化,即电场絮凝。电场絮凝可以大大降低絮凝剂的用量,增加絮凝体的大小和强度,缩短絮凝时间。电场絮凝不但可以用于混悬液的液固分离,亦可以代替部分乙醇沉淀等过程。 3.2 超滤浓缩 膜分离技术是以压力为推动力,利用膜的选择性实现混合组份的分离。膜分离主要包括微滤、超滤、反渗透及纳滤。超滤(Yltrafiltration))是根据体系中分子的大小和性状,通过膜的筛分作用,在分子水平上进行分离,可分离分子量为1000道尔顿~1000000道尔顿的物质,起到精制、富集及浓缩的作用。同微滤过程相比,超滤过程受膜表面孔的化学性质的影响较大。影响超滤效果的主要因素包括膜的选择性、料液预处理方式、压力、流速、温度、浓度、pH值、时间、膜再生的方式等。 目前超滤主要用于浓缩、分级、大分子溶液的净化等。应用时主要应考虑膜的寿命、膜面污染的防治、清洗及膜的再生方式。 3.3 高速离心 通过离心机的高速运转,使离心加速度超过重力加速度的成百上千倍,从而使沉降速度增加,以加速药液中杂质沉淀并去除的一种方法。沉降式离心机分离药液具有省时、省力,药液回收完全,有效成分含量高、澄明度高的特点,更适于分离含难于沉降过滤的细微粒或絮状物的悬浮液。 3.4 分子蒸馏 分子蒸馏(molecular distillation)是一种在高真空度下进行的液—液分离操作的连续蒸馏过程,它亦是一种在高真空度条件下进行非平衡分离操作的连续蒸馏过程。它是基于在一定的温度和真空度下不同物质的分子平均自由程差异,液体混合物各分子受热后会从液面逸出,并在离液面小于轻分子平均自由程而大于重分子平均自由程处设置一个冷凝面,使轻分子不断逸出,而重分子达不到冷凝面,从而打破动态平衡而将混合物中的轻重分子分离。由于轻分子只走了很短的距离即被冷凝,所以分子蒸馏亦称短程蒸馏(molecular distillation)。 在分子蒸馏过程中,物料处于高真空、相对低温的环境,停留时间短,损耗极少,故分子蒸馏技术特别适合于高沸点、低热敏性物料。目前该技术已广泛应用于石油化工、医药、食品、化妆品等行业。对于一些热敏性极强的物料(如二十八烷醇和三十烷醇的分离)、天然维生素:等分子蒸馏均取得良好的分离效果。 目前有关分子蒸馏基础理论的研究非常少,还无法从理论上指导分子蒸馏器的设计,现有的分子蒸馏器的设计主要是依靠经验,而且只局限于对降膜式分子蒸馏器和离心式分子蒸馏器液膜内流动状态、传热、传质及汽相分子的运动状况的研究。对刮膜式分子蒸馏器设计研究很少的主要原因是很多情况下降膜式和离心式分子蒸馏器内液膜的流动状况可以看成是稳态层流,而刮膜式分子蒸馏器内的液膜流动为非稳态的湍流流动。 国内对分子蒸馏技术的研究起步较晚,基础较弱,现在还处于消化吸收及小试研究阶段。分子蒸馏技术目前面临的主要课题是扩大应用领域,尤其是对一些分离难度大的天然药物的应用。 3.5 大孔吸附树脂 大孔吸附树脂是由有机单体加交联剂、致孔剂、分散剂等添加剂聚合而成,是不含离子交换基团的由许多微观小球组成的多孔球状交联聚合物。 树脂理化性质稳定,不溶于酸、碱及有机溶媒,不受无机盐类及强离子低分子化合物存在的影响。依据其表面性质的差异可非极性、极性和中性大孔吸附树脂。大孔吸附树脂是吸附性和筛选性原理相结合的分离材料。它本身具有的吸附性,是由于范德华力或产生氢键的结果。筛性原理是由于其本身多孔性结构所决定。大孔吸附树脂根据孔径、比表面积及构成类型被分为许多型号,一般根据所需分离纯化物质的分子大小及极性强弱,选用与之相适应的大孔吸附树脂,可收到较好的分离效果。影响大孔吸附树脂分离效果的主要因素包括比表面积、孔径、粒径、强度、溶胀系数、孔的三维结构等。一般根据所需分离纯化物质的分子大小及极性强弱,选用与之相适应的大孔吸附树脂。大孔吸附树脂可用于多种药用成份的分离,还可用于含量测定前样品的预分离。应用大孔吸附树脂富集药物有效成分,具有分离度好、专属性强及重现性好,无杂质干扰,灵敏度高等特点。在实际应用中,要达到满意的分离效果,必须根据化合物的结构特点并综合考虑各种影响因素,设计合适的分离条件,在必要情况下,可进行预试验而确定。
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