中国专家说：非瘟检测

1、非洲猪瘟耐过猪还存在排毒风险吗？这种猪的脾脏、口鼻拭子、抗凝血等均检不出ASFV核酸，却产生了高水平的ASFV抗体的原因是什么？

仇华吉答：耐过猪经过一段时间的恢复，可以产生抗体并清除其外周血中的病毒，但其体内仍然存在病毒，可能存在于其脾脏、淋巴结、扁桃体等部位，会不会再扩散到全身取决于猪场的饲养管理、猪只的应激等条件。耐过猪的排毒风险仍然存在，受到应激时可能会排毒，建议有阴性猪源时淘汰耐过猪，实在不能淘汰时要基于抗体和抗原检测分类、分群饲养。

“野疫苗毒”潜伏期长，感染后不会很快引起明显临床表现。然而一旦发现猪只表现异常，病毒可能已在猪群中悄然扩散。因此实验室常规监测非常重要，同时不放过对任何临床异常猪只的检测，不仅要检测病原，还要检测抗体。病毒也并非完全无法快速检测，只不过是病毒载量偏低，所以检测方法应更加敏感和特异，特别要注意引物和探针与靶标序列是否完全匹配。建议猪场遴选敏感性更高的荧光定量PCR试剂盒。建议全面采样，尤其是咽拭子比较适合于“野疫苗毒”检测，由于存在间歇排毒情况，需要多次跟踪检测，以筛查“野疫苗毒”感染猪。最好同时检测抗体，如果呈阳性，表明猪群已经感染1周以上，应全群检测、分类处置。特别是引种时，要同步检测病毒和抗体。

2、非洲猪瘟ELISE抗体检测是测的中和抗体吗？引种时，抗体检测有无意义？

张桂红答：根据ASF抗体检测试剂盒包被的蛋白不同，其检测的抗体也不同，检测的不是中和抗体。但是抗体检测还是有意义的，比如可以鉴定猪场中是否有耐过猪，可以为猪场预警，提前关注其遇到刺激可能会再次排毒情况。

由于还无更好的方式鉴别病毒的死活，所以检测出的结果是核酸而非活病毒，也就是说检测的结果会高于活病毒的数量。因此引进的仔猪或后备猪，一定要做抗原与抗体的双重检测，结果才更准确。

3、若使用非法非瘟疫苗后一段时间，此时动物体内疫苗毒株已经检测不到，那么则可以检测动物体内的抗体来判断是否使用过疫苗或者是否感染野毒株。非瘟抗体如何检测？

陈焕春答：检测抗体仍需针对基因缺失毒株研发相应的抗体检测试剂盒。

4、现在猪价高，种猪价格更高，我们想把非瘟后死剩下的肥猪留作种用，您看这样可以吗？如果可以，要注意哪些问题？

邵国青答：目前带毒生产不可行。留种种猪必须是非洲猪瘟病毒的抗原、抗体检测都是阴性的，否则不建议留种。猪场精准清除成功后，非瘟抗体、抗原都是阴性的猪可以留作种用。

5、得了非瘟不死亡的猪，是否会再次感染？

邵国青答：完全可以，也可能会本来就间歇性排毒。

6、发生非洲猪瘟后留下的猪，猪血液中可以检测到抗体吗？多久就会检测不到？

邵国青答：如果是感染了非洲猪瘟病毒的猪，一般可以检测到抗体，多久检测不到抗体对于中国感染毒株还没有数据报道。

7、苗毒猪、耐过猪、抗体阳性是否可以饲养？

张翼飞答：国外研究，非瘟耐过猪可以传播非瘟病毒。据VeterinaryMicrobiology2019年10月第 237期刊登的文章表示，荷兰瓦宁格大学生物兽医学研究所 (Wageningen Bioveterinary Research; WBVR)研究人员发现，临床健康的带毒康复猪（非瘟耐过猪）可以引发非瘟急性感染，造成非瘟病毒在猪群中持续存在。本研究结果显示耐过猪对阴性猪的传染系数（β带毒猪）为0.039头/天; 阴性猪感染期系数（T带毒猪）为25.4天。国内之前对非瘟野苗猪以及耐过猪是否可以继续饲养一直持有争议，经历了2年多的非瘟疫情，从临床以及国内相关专家研究，均多次在公开场合明确了这一观点，非瘟耐过以及苗毒猪建议淘汰，耐过以及疫苗猪虽然血液以及口鼻肛拭子虽然检测不到核酸，但体内组织可能带毒，在应激等情况下可能排毒，病毒携带猪是猪场的定时炸弹，建议拔牙淘汰。

弱毒的潜伏期大大延长，3种样本（唾液、血液和粪便）核酸最早检出时间：弱毒接近7天,而强毒仅2-3天。强毒组血液排毒水平最高(肌肉接种Ct = 27.91±8.70;接触感染Ct= 31.05±9.30)，12天时病毒血症达到高峰(接触感染Ct = 16.32±0.68)。弱毒组血液标本核酸呈间歇性弱阳性，有时测不出。qPCR的Ct值较高(口服接种Ct = 39.32±2.64;接触感染Ct= 38.87±2.51)。依据以上非瘟弱毒潜伏期长和间歇性弱阳性的特点，在核酸检测阴性的情况下，亟待需要补充抗体筛查拔牙。抗体的最早产生时间通常5-7天，原本强毒潜伏期短、病毒载量高不需要抗体筛查，但是弱毒的潜伏期与抗体产生期相当,甚至大于抗体产生期，并且病毒载量低非常容易漏检，而抗体检测较为稳定可靠。