兽药残留消除试验的分析方法

兽药作为动物疾病防治的重要保障，对改善动物生产性能和产品品质、保持生态平衡等多方面具有重要功能，是畜牧业健康发展、食品安全和公共卫生的重要保障。但不合理使用和滥用兽药及饲料药物添加剂的情况普遍存在，既造成了动物食品中有害物质残留，又对人类健康造成损害，同时还威胁到环境和畜牧业持续健康发展。

为了保障动物性食品的安全性，使用兽药后的动物，或者类似蛋、奶类动物源性食品在上市销售前，都要停止使用兽药一段时间。这段时间便是休药期，休药期的制定是为了给兽药残留彻底或规定限量范围内消除给予一定的缓冲时间，也是为了将兽药残留对消费者产生的毒害作用降到最低。按照兽药残留检测的相关规定，用于食品动物的兽药产品均需通过兽药残留消除试验制定休药期。也就是说凡申请在食品动物（如牛、羊、猪、禽等）使用的兽药均需要进行残留消除试验确定休药期。

兽药残留消除试验多是针对动物可食性组织或蛋奶产品等样品检测，而且一般需要定性定量分析。所以兽药残留消除试验选择的分析方法，就要求具有灵敏、专一、精确、可靠等特点。而且要充分考虑到，可能面临的取样量少、药物浓度低、内源性物质干扰多、个体差异大等问题。尤其是内源性干扰物质要充分到，可能存在的激素、维生素、胆汁及其他同期服用的药物等物质。

兽药残留消除试验选择分析方法的依据，可采用标准方法、非标准方法以及允许偏离的标准方法。标准方法顾名思义就是采用一些国家标准、行业标准、地方标准、农业部公告给出的检测方法作为依据，涉及到国外标准，可参考CAC、AOAC、美国FSIS、欧盟等检测方法标准。非标准方法则是指具体根据需求指定的兽药残留检测方法。而允许偏离的标准方法，则是指超出标准规定范围使用的标准方法；经过扩充或更改的标准方法。

常见兽药残留消除试验中分析方法主要有色谱法、免疫学方法、微生物学方法等。其中色谱法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、色谱－质谱联用法等，可用于大多数药物的检测。从目前发展看，生物样品的分析一般选择色谱法，这类方法灵敏度、特异性、准确性一般都能适应残留消除研究的需要。具体选用何种分析方法应根据药物的化学结构、理化性质、仪器条件以及借鉴文献方法多方面因素来考虑确定。免疫学方法主要有放射免疫分析法、酶免疫分析法、荧光免疫分析法等，多用于蛋白质多肽类物质的检测。微生物学方法主要用于抗生素或部分抗寄生虫药的检测，如果抗微生物药的代谢产物仍有抗菌活性，则不宜选用微生物法。

无论选择哪种方法，都要按照方法学验证的要求进行验证。方法学验证是整个残留消除试验研究的基础。为了保证分析方法可靠，必须对方法进行充分验证。在进行方法验证时要充分考虑到样品的特异性问题、 标准曲线和定量范围的选择问题、 检测限和定量限的问题、准确度与精密度的问题、 样品稳定性问题、质量控制问题等。尤其微生物学或免疫学方法，他们的标准曲线本质上是非线性的，所以应采用比化学分析更多的浓度点来建立标准曲线。结果的准确度是关键因素，如果重复测定能够改善准确度，则应在方法确证和未知样品测定中可采用同样的步骤。