非洲猪瘟的诊断技术（图）

2、荧光抗体检测(FAT)

用疑似感染ASF的猪组织制作涂片或冰冻切片，内源性的抗原可与特异性的 AFSV 荧光抗体结合，显微镜直接观察结果。优点是快速、特异高，对于急性病例的诊断灵敏度较高，但对亚急性或慢性 AFS，由于自身抗体会阻断荧光抗体与抗原的结合，容易出现假阴性结果。

3、抗原 ELISA

病毒抗原也可用ELISA检测，但只推荐在急性病例时使用，灵敏度没有PCR检测方法高。第一个直接 ELISA 检测 ASFV 的方法能检测的抗原浓度是 50-500 HAD50/ml。后来基于 VP72 单抗的双抗夹心法 ELISA 具有较高的灵敏性。分子诊断技术目前 qPCR 被认为是 ASFV 基因检测的金标准，被用在 OIE 所有的区域性参考实验室。血液、血清和组织样本都可用于 qPCR 检测。优点是快速、敏感性和特异性都很高。能够检测出所有 ASFV 毒株(23 个基因型)，甚至因保存不当而降解的样本也可用于检测。但容易因交叉污染出现假阳性的结果，此外，因 PCR 抑制物及核酸降解出现的假阴性也应该注意。

King首次报道TaqMan探针荧光定量PCR检测方法，该方法在 OIE推荐方法，引物针对 VP72 保守区域，有很高的特异性和灵敏度，针对 25 种ASFV 毒株和 16 种非洲及欧洲的软蜱 ASFV 毒株，灵敏度达到 10-100 个核酸分子。

现在在使用的几种分子诊断技术见下表1：

表1：Real-time PCR, Linear-After-The-ExponentialPCR (LATE-PCR) 和等温扩增技术

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