陈家锃：检测在非洲猪瘟防控中的科学应用

（4）区域实验室可通过改造通风设施降低气溶胶污染

1）实验室设计按试剂配制区、样本制备区、PCR扩增区进行物理性分区，每个区域都要保障独立通风，对于PCR扩增区更需要设置大功率排风扇不间断的将气溶胶排出试验区域；

2）加样和试剂配制需在生物安全柜里完成（非超净工作台，超净工作台仍然是气体内循环的，不能有效清除气溶胶），如没有生物安全柜，通风橱是高性价比的解决方式；

3）下班后实验室需保持密闭状态，需关闭排风扇，打开紫外灯，以消除环境核酸污染；

4）实验室内需定期消毒，除用紫外线照射外，可用氯制剂如84消毒液去除试验台和地面的核酸污染；

5）移液器、离心机均可用稀释后浓度为30%的84消毒液擦拭，但在消毒后需用清水反复擦洗干净；

6）选择有内参的检测试剂，通过内参曲线可监控实验操作人员的操作是否规范。此外内参的Ct值及曲线可反馈PCR反应的效率，可降低由于样本抑制PCR反应但被误判为阴性的可能。

7）实验室需准备2～3种试剂盒，一旦疑似假阳性时，可先用另一种试剂进行复核，如另一种试剂盒检测为阴性，极有可能是存在PCR产物的气溶胶污染。需从硬件设施，操作、耗材（如PCR管是否密闭性良好）等方面找到污染的原因。

四、小结

过度检测是对检测资源的浪费，日常监测应重点在外围监测和对异常猪的确诊上。即使是在紧急情况下，也需要专业人员在充分了解猪场现状的前提下，根据统计学制定相应的检测方案，合理的采样发挥检测的效能。

为了保证检测结果的可靠，兽医应加大对基层采样人员的采样流程培训和监督考核，让生产体系和检测体系形成合力。在硬件设施上，建设标准化PCR实验室是降低污染的基础，养殖集团需要建设高标准的中心实验室作为终评机构。

相信在2020年我们必然在非洲猪瘟防控体系上更上一层楼，养殖集团会以检测数据为基础，更为合理地进行风险预警与猪群排查，在定点清除中的方案会更精准、更有效、损失最小，这需要检测中心将数据统计和临床工作相衔接，这更需要两个体系深度的融合。坚信中国养殖人的聪明才智和不懈努力，最终能战胜非洲猪瘟。

王长年专家点评：

自非洲猪瘟传入国内后，我们很多猪场逐渐意识到检测和监测的重要性，并陆续建立了各自的检测实验室。基于对非洲猪瘟传入风险的分析，我们对关键风险点进行监控是非常有必要的。在具体的工作中，我们需要注意以下三点：第一、强化针对非洲猪瘟的生物安全流程设计，注重清洗、消毒效果的评估。检测、监测是为了及时发现可能存在的风险，逐步优化和改善工作流程，建立科学合理的标准操作程序。一旦流程建立，就可以采用编组抽查的方式进行采样和检测，避免过度检测而造成实验室超负荷运转、检测人员打疲劳战。第二、实验室的检测结果是疫病诊断的一种重要的参考，但不是唯一的依据，还需要结合生产实践、流行病学调查、临床表现、病理病变等进行综合判断。第三、我们要充分认识实验室检测的局限性。检测结果经常会受到临床采样、样品的运输保存、检测方法、操作过程、实验室布局等方面的影响，可能出现假阳性或假阴性的结果。

本文作者陈家锃博士结合其临床抗非经验，提出“过度检测，适得其反——检测在非洲猪瘟防控中的科学应用”。首先，他强调要依据统计学规律，根据猪群分布特点和疾病传播特点制定科学的采样方案，并关注环境污染（如气溶胶）。不恰当的过度检测会导致检测效率降低，时间、金钱投入多，导致检测结果的错误。其次，他提出如何科学采样、合理配置资源，不仅“授之以鱼，还能授之以渔”。最后，针对实验室检测，提出关注采样流程、设备配置、疫病诊断、实验室标准化和气溶胶污染等方面，以提高检测结果的可靠性。希望大家尽可能做到精准检测、持续提升、管控风险、助力抗非。

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